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反转录PCR

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DoubleHelix
发布2019-08-07 10:20:03
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发布2019-08-07 10:20:03
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文章被收录于专栏:生物信息云生物信息云

1.反转录原理

反转录PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)又称为逆转录PCR。其原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。

2.反转录试剂盒

3.PCR酶和PCR体系

试剂盒:

其他试剂盒:

4.PCR程序


注:具体操作步骤可直接搜索对应试剂盒的说明书,大连宝生物官网:http://www.takarabiomed.com.cn/

RNA提取可阅读文章:TRlzol法提取组织或细胞的RNA

如果提取的RNA用于做定量PCR,提取的RNA 可直接用试剂盒(PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time))去除基因组DNA,同时反转录为cDNA。然后在用于做RT-qPCR。

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