专栏首页聊点学术这种慢性肾衰大鼠模型,想想就很痛。

这种慢性肾衰大鼠模型,想想就很痛。

不知道大家有没有这样一种感觉?

“ 刚接触动物造模时,总是有一种极强的代入感。”

非常心疼小动物,觉得自己就像那只躺在木板上的老鼠,生无可恋,等待各种未知的“操作”。

从这点来看,做细胞实验还是稍有心安的,至少细胞不会喊不会叫。

今天就介绍一种“很痛”但又比较常用的慢性肾衰大鼠模型


众所周知,肾脏作为泌尿系统中最关键的器官,每天都承载着巨大的血液滤过功能。

慢性肾脏衰竭是由于各种原因导致肾脏实质损害,如果损害因素没有及时被撤走,日久天长就会引起进行性肾功能减退,表现为氮质及其代谢产物潴留、电解质紊乱、TPO降低等,造成的后果就是贫血,血肌酐、血尿素氮、血磷升高,血钙下降等,最终肾脏萎缩变小,且不可逆转。

临床上将肾衰分为肾前性、肾性和肾后性。肾前性多因肾脏灌注不足导致,肾性多因肾实质损害导致,肾后性多因尿路梗阻。

今天要介绍的动物模型为大鼠5/6肾切除慢性肾衰模型。应该会很痛。

(正常肾脏)

(肾脏5/6切除后)

这种模其本质上属于肾性肾脏衰竭。

为什么呢?

大鼠肾脏被切除5/6后,残余的肾单位会承担全身的血液滤过功能,这种血流动力学改变直接导致肾小球高滤过,最终发生以肾小球硬化为主要病变的慢性肾衰。

下面是手术过程。

(1)术前测定无蛋白尿的200g±20g雄性大鼠采用戊巴比妥钠腹腔麻醉后,仰卧位固定在垫有电热毯的木板上,腹部备皮后常规消毒皮肤。麻醉剂量参考往期 → 动物麻醉剂量和途径,你真的清楚吗?

注:①大鼠经常出现自发性肾病,术前测量大鼠无蛋白尿很重要。②雄性大鼠可以避免生理周期带来的个体差异。③麻醉和腹腔暴露手术会导致动物体温明显降低,保暖可减少动物术后死亡率。切记切记。

(2)腹部正中做开口,开口不宜过大,暴露右侧肾脏即可。小心剥离右肾表面的被膜,采用3-0手术线结扎肾门,小心切除全部右肾,然后恢复腹腔脏器至原位,快速逐层缝合关腹。术后保暖至动物恢复清醒。

注:①开口太大将导致术中脏器过度暴露,体温丢失快,后期愈合慢。②切除右肾时一定别把右侧肾上腺切了,两者挨着很近。③关腹到最后时刻将大鼠腹腔中的气体轻轻挤出再完全缝合。④术后保暖很重要,不在赘述。

(3)大鼠术后恢复10天开始第2次手术,采用同样的方法麻醉并固定动物。腹部正中开口,迅速切除左肾的上下各1/3。明胶海绵快速吸干血液后滴几滴凝血酶溶液帮助止血,然后快速关腹。术后保暖。

注:①切除左肾时速度要快,但注意不要损伤输尿管,更不要剪断输尿管。②切除左肾的操作最好让同一位术者操作,保障残余肾单位体积基本一致。③纱布止血压要快,否则失血会很严重,甚至导致动物死亡。④凝血酶溶液滴完后,需确认无较大出血再关腹,否则关腹后的大出血是没办法处理的。

(4)第2次术后大约15周左右,大鼠即可表现出明显的慢性肾衰竭征象。检测动物们的胱抑素C、血肌酐、尿素氮、血钾、血磷、血钙、蛋白尿、24小时尿量,还有血细胞计数等,作为评价模型的生化指标。此模型的组织病理学改变主要是残余的肾单位中肾小球硬化、结构丢失、纤维化等。

(正常肾小球)

(肾小球硬化)

本文分享自微信公众号 - 聊点学术(SingForScience),作者:Mark

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原始发表时间:2020-06-28

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