关于光密度值，90%的人混淆了这两个概念！

通过总结近期大家在公众号后台的咨询情况，我感觉大家对光密度及其衍生出的两个概念存在不小的混淆——积分光密度、平均光密度。

因此，我觉得有必要单写一篇推文阐述一下这些概念。

▼ 1.为什么会存在概念混淆现象？

问题由来已久。

早期，免疫组化染色的结果判定是通过分级法来做的（现在还在用）。通过肉眼观察，将染色深浅和染色区域大小划定为4个级别，然后再对这些结果进行统计分析。

后来，科研界越来越强调数据的丰富度，加上体视学的发展。大家发现光密度值可以用来反映细胞化学反应的量。

问题就出在这里。由于没有很好地理解光密度概念，导致早期发表的论文（主要是国内期刊）里混淆或错用了相关概念，不同论文中的光密度值甚至能相差数百倍，尽管这些论文中都称自己测量的是“平均光密度”。

如果你延续实验室传统或参考了这些内容，自己也未曾深入探究，最终会导致自己无法判定测量的数据是否正确。

▼ 2.光密度的概念？

现实中，任何彩色的物体对单色光的吸收程度不同，因为会产生不同的吸光度或光密度（OD）。

灰色或黑白图像则是通过0-255灰度值来反映灰度差异。对于切片上的组织或细胞而言，一定的棕色物质（DAB染色）吸收了一定波长的光，从而显示出一定的色彩。OD值越大，说明透光度越低，表示阳性物质的含量越高。

由此，衍生出积分光密度、平均光密度两个重要概念。

▼ 3.积分光密度的概念？

我们在研究时，常常想通过OD值来反映阳性物质的相对含量，这个含量应该是玻片上目标区域内的阳性物质总含量。

载玻片上的组织或细胞被拍摄成图像后，定量分析的目标就变成了图片，而图片是由非常多的像素组成。每个像素OD值都不同，所有这些像素的OD值加在一起，才是我们想要的结果，这个结果就叫积分光密度（IOD）。

还没完。

积分光密度也衍生出一个概念，叫面积积分光密度。它的含义表示组织或细胞的截面内阳性物质的总含量。

这样看来，在论文中我们更应该使用面积积分光密度这个词，最次也得使用积分光密度来表述。

▼ 4.平均光密度的概念？

前面说到，图像是由非常多的像素形成，每个像素的OD值不同。所有像素的OD值之和再除以像素的个数，就叫平均光密度。也就是像素的光密度的算术平均值。

这样一来，平均光密度代表的就是阳性染色区域图像像素的平均OD值，用人话说就是阳性染色物质的颜色深浅。

看到这里，我估计很多人已基本明白了以上概念。

根据这些内容，我再朝前推演一下。实际测量后，积分光密度的数值肯定较大，它代表的是所有OD值的总和；平均光密度的值肯定是较小的，它只是单个像素下的平均OD值。

这些概念在测量时，该如何在软件中去设置和甄别呢？大家点赞或转发支持一下，给我继续更新提供动力吧，哈哈。