话说上次更新完在线基因组浏览器的推文,小伙伴们都很感兴趣。
一步一步教你用基因组浏览器(图文)
这次我们一起科研论文中常用到的桌面级基因组浏览器 IGV,优势在于可以离线使用,方便大家直接查看本地文件,而且渲染速度相较在线基因组浏览器网站要快不少。
这篇推文同样以实战的形式教大家快速上手。

软件下载
IGV 官网下载:
http://software.broadinstitute.org/software/igv/download
这里以下载预装 Java 的 Windows 版本 IGV 为例。

由于大部分数据是通过服务器跑出的结果,所以也有小伙伴有在 Linux 服务器端使用的需求。这里推荐几种方式:
建议最好安装在固态硬盘所在分区,提高加载速度。

如果没有在桌面找到 IGV 软件,按住 Win 键,搜索 igv 可以找到并运行

IGV 有下载文件的需求,所以要通过网络访问权限

1
数据载入
为了方便介绍功能,我们需要先下载几个测试数据:
测试数据来自人肝脏的 DNaseq 数据,分别为bigbed 文件与 bigwig 文件:
bigbed 文件:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/download/?acc=GSE172690&format=file&file=GSE172690%5FENCFF812QNX%5Fpeaks%5Fmm10%2EbigBed
bigwig 文件:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/download/?acc=GSE172690&format=file&file=GSE172690%5FENCFF705ESF%5Fread%2Ddepth%5Fnormalized%5Fsignal%5Fmm10%2EbigWig
想了解更多基因组相关文件格式:https://blog.csdn.net/u011262253/article/details/109367884
载入数据:

成功载入数据

切换到其中一个染色体:

2
软件面板

这里分五大部分来介绍:
工具栏
从左到右依次为划分为三个小工具:
参考基因组工具

a. 选择参考基因组物种及版本,如果没有本地版本,需要联网下载
b. 选择染色体编号
c. 搜索染色体区间,格式如图所示,最常用的功能还是输入感兴趣的基因,直接跳转到对应的位置

视图操作工具

依次为主页面,前一步,后一步,刷新,定义区域,Trace适屏,弹出信息显示
缩放工具
用于控制整个视图的缩放比例,快捷键

轨迹信息栏
右键可以打开菜单,进一步修改,后面详细来研究。
基因组窗口
上部分为整条染色体,点击即可跳转该位置

下半部分为目前染色体可见部分对于的染色体位置,用刻度线标识,单位为碱基数。

轨迹窗口
每一行代表一个样本的 Trace,右键可以打开菜单,进一步修改,后面详细来研究。
基因窗口
显示基因的特征区域,可以与 Trace 面板配合,来查看研究区域的生物学信号。

常用操作
1
下载参考基因组及注释
More:


2
数据加载
目前支持的格式包括:
拖动文件到轨迹窗口

本地文件载入
右上角点击 File -> Load from File,选择本地文件即可

通过 URL 加载
如谷歌的数据gs://genomics-public-data/platinum-genomes/bam/NA12877_S1.bam,自己有服务器最好建立 ftp 站点,方便查看

通过官方服务器加载
这里有一些公共项目的数据集,有兴趣的小伙伴可以多浏览

3
搜索
在工具栏的搜索框输入,图中 C 的位置:

有几种搜索方式:
chr6:64,664,854-64,666,044pou5f1,但是不支持别名等其他名称搜索KRAS:G12C,搜索 KRAS 第 12 个氨基酸上,从G 到 C 的突变。* 表示终止密码子123A>T,搜索 KRAS 第 123 个氨基酸,从 A 到 T 的突变4
放大缩小
Shift 健,单击轨迹窗口+Alt 健,单击轨迹窗口5
滚动平移
← 和 →键Home 和 End 键↑ 和 ↓ 键Page Up 和 Page Down 键6
右键菜单
在轨迹信息栏和基因窗口都可以右键呼出如下菜单栏,我们在出图时会依次用到


绘图
1
折线图
右键选择折线图选项

修改颜色

设置颜色

设置数据值域

输入数值,也可进行 log 标准化

这里试试设置不同的数据范围,也就是值域,这里注意 Y 轴变化
Min,Mid,Max 依次为 0,0,0.2,效果如下

Min,Mid,Max 依次为 -0.2,0,0.2,效果如下

Min,Mid,Max 依次为 -1,0,1,效果如下

最终效果如下:

2
散点图
切换到散点图选项

设置同折线图,效果如下

3
条形图
切换到条形图

设置同折线图,最终效果

4
热图
选择热图选项

配置参数

设置

效果

总结一下,一共可以绘制四种图,包括:
热图

折线图

条形图

散点图

5
基因
右键可以打开设置菜单,一共有三种形式选择:

堆叠形式
多个转录本堆叠在一起显示

展开形式
分别显示多条转录本

压缩形式

6
保存图片
支持格式两种 png,svg。这两种格式导出后,用 PS 和 AI 修改后就是论文中常见的图啦。

其实今天和大家一起探讨的只是冰山一角的 igv 使用技巧,如果小伙伴们有其他的使用方法,欢迎一起讨论。