注 | 以下操作指南中涉及的消化酶以及实验方法仅供参考,实际应用过程中请根据具体情况进行细节上的调整。
食管:是消化管道的一部分,上连于咽,沿脊柱椎体下行,穿过膈肌的食管裂孔通入胃,全长约25厘米。依食管的行程可将其分为颈部、胸部和腹部三段。食管由黏膜、黏膜下层、肌层、外膜组成,其中黏膜由上皮组织、固有层(主要为结缔组织)和黏膜肌层组成。黏膜下层主要由结缔组织构成,其中富含食管腺,食管腺周围常有较密集的淋巴细胞和浆细胞,甚至淋巴小结。肌层分为内环行和外纵行两层,都由肌肉组织组成。
本实验使用两性霉素B清除食管上残留的微生物,胶原蛋白酶消化食管组织,胶原酶提供广泛的蛋白水解活性,但优先切割细胞膜外的蛋白,所以基本上保持细胞完整。
食管组织及结构示意图
细胞量:81万左右,活率95%以上,结团率12%
注:食管癌组织在取样的时候,要尽量避免掺入食道软骨或黏膜等组织,这些组织存在会使细胞悬液的杂质量增多,以及影响酶解效果