文章标题:《A Single-Cell Atlas of the Human Healthy Airways》
发表日期和杂志:2020年发表在American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine Volume上
在线阅读链接:https://doi.org/10.1164/rccm.201911-2199oc
通过单细胞RNA图谱研究沿呼吸道的细胞种群分布和转录变化,采用单细胞RNA图谱技术对10例健康活体志愿者的呼吸道上皮细胞异质性进行了研究。
10名健康志愿者采用两种取样方法从4个不同部位分离细胞,对细胞进行单细胞RNA测序(scRNA-seq)分析:
总共在35个不同的位置收集了77,969个细胞,从鼻子到呼吸道树的第12部分。
数据链接是:https://www.genomique.eu/cellbrowser/HCA/
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rm(list=ls())
options(stringsAsFactors = F)
source('scRNA_scripts/lib.R')
getwd()
###### step1: 导入数据 ######
ct=fread( 'Raw_exprMatrix.tsv.gz',data.table = F)
ct[1:4,1:4]
rownames(ct)=ct[,1]
ct=ct[,-1]
sce.all =CreateSeuratObject(counts = ct ,
min.cells = 5,
min.features = 300 )
dim(ct)
dim(sce.all)
as.data.frame(sce.all@assays$RNA$counts[1:10, 1:2])
head(sce.all@meta.data, 10)
table(sce.all$orig.ident)
Idents(sce.all)
sp='human'
对读取进来的数据进行质控、harmony整合以及单细胞细分亚群定义等。
第一层次分群,得到21个细胞亚群,使用BioinfoArk提供的中国区chatGPT查询到各个细分亚群的解释,并且对B细胞和plasma细胞进行了详细的解释
因为之前对B细胞和Plasma细胞不太了解,所以让chaGPT对这两类细胞做了详细的介绍
B细胞是一种免疫细胞类型,它们是免疫系统中的一部分,起着重要的抗体产生和免疫记忆的作用。B细胞主要存在于淋巴组织和骨髓中。当免疫系统检测到外来的抗原时,B细胞会通过表面的抗体受体与抗原结合,激活并开始增殖。这些活化的B细胞可以分化为两种类型的细胞:记忆B细胞和浆细胞。
记忆B细胞是长寿命的细胞,它们能够长时间保持对特定抗原的记忆,并在再次暴露于相同抗原时迅速启动免疫反应。记忆B细胞的存在使得免疫系统能够更快、更有效地应对再次感染。
浆细胞(plasma cell)是由活化的B细胞分化而来的细胞,它们是抗体的主要生产者。浆细胞具有高度发达的内质网和细胞器,能够大量合成和分泌抗体。抗体是一种特异性蛋白质,能够与抗原结合并中和病原体或标记它们以便其他免疫细胞清除。浆细胞通常存在于淋巴组织和骨髓中,但它们也可以在炎症或免疫应答中暂时出现在其他组织中。
B细胞和浆细胞在免疫系统中起着重要的作用,通过产生抗体来保护机体免受感染和疾病的侵害。
通过统计分析发现基底细胞(Krt5、TP63和DLK2高)占所有细胞的三分之一,还发现了超基底细胞,其特征是TP63低表达,Krt5表达梯度降低,KRT19和NOTCH3表达梯度增加
将club细胞和goblet细胞归类为分泌细胞,因为这两个群体不能单独聚在一起,并且本质上存在MUC5AC和MUC5B表达水平的差异
检测到多纤毛细胞簇(高水平表达FOXJ1、TPPP3和SNTN)和宫体细胞,它们对应于多纤毛细胞的前体,并表达几个特定的标记:DEUP1、FOXN4和CDC20B
基底层以上的、分泌性的和多纤毛的细胞团中的每一个都包含一个只有在鼻腔样本中才能检测到的细胞亚群,这些簇被标记为“上基底层N”、“分泌性N”和“多纤毛N”
将4,891个免疫细胞分成七种不同的细胞类型
发现4种髓系细胞:
鉴定了三类淋巴样细胞:
但是分析没有很好地分离T细胞和相关亚型,其特征是XCL1和CD3D调节单元具有高而特异的转录活性
注释了四种基质细胞类型
基质细胞只有在活检组织中才能发现,特别是在中间样本中
包括高水平表达ACKR1的内皮细胞,高水平表达FBLN1的成纤维细胞,以及以高水平的DES(结蛋白)和高活性的HOXA4调节单元为特征的平滑肌细胞
基于RERGL、MCAM和PDGFRb等标志物的特异性表达鉴定了周细胞,这是一种位于毛细血管基底膜上的具有收缩特性的内皮周围间充质细胞群。周细胞与平滑肌细胞也有共同的标记,如ACTA2和MYL9