Cisplatin顺铂肾损伤模型构建｜Cisplatin顺铂溶解方案｜MCE

Cisplatin (CDDP) 是一种抗肿瘤的化疗剂，它与 DNA 交联引起癌细胞中 DNA 损伤。Cisplatin 可激活铁死亡 (ferroptosis) 并诱导自噬 (autophagy)。纯度: 99.30%；别名：顺铂; cis-Platinum; CDDP; cis-Diaminodichloroplatinum。

Top, FHs 74 cells were pretreated with mannose and then cisplatin. Bottom, cells were pretreated with mannose and DON (40 μM) and then cisplatin.

体内研究 (In Vivo)

Cisplatin 可用于诱导急性肾损伤模型[7][8]。

诱导急性肾损伤 (AKI)[7][8]

致病原理

顺铂引起的急性肾损伤 (AKI) 的发病机制复杂，氧化应激、线粒体功能障碍、炎症和细胞凋亡都参与顺铂诱导的 AKI 的进展。氧化应激是顺铂诱导的 AKI 损伤的主要机制。

具体造模方法：

小鼠：C57BL/6 • 雄性 • 6 周龄 (处理：2 周) 给药方式：5 mg/kg • 腹腔注射 • 每天 1 次，共 2 周

Note

(1) 建议使用雄性小鼠，因为雌性小鼠对肾损伤的抵抗力更强。 (2) 小鼠在诱导前 18 小时可以禁食物和水。给药之后，可以给与食物和水。 (3) 顺铂可以溶解在无菌盐水中来制备注射工作液，注意避光。

造模成功指标

代谢变化：血清肌酐 (SCr)，血尿素氮 （BUN） 水平，中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (NGAL)，硝基酪氨酸 水平升高。

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体外研究 (In Vitro)

Cisplatin (CDDP) 以剂量依赖性方式引起 HeLa 细胞凋亡，浓度为 30 μM 的 Cisplatin 导致 24 小时处理后 90% 以上的细胞死亡。使用 30 μM 浓度检查 Cisplatin 诱导的细胞凋亡的动力学。Cisplatin 激活 MEK/ERK 信号通路，20 和 30 μM Cisplatin 均会导致显著的细胞凋亡，导致 ERK 的强烈激活[1]。 Cisplatin (50 μM) 在肾近端小管细胞 (RPTC) 中产生时间依赖性细胞凋亡，导致细胞收缩，半胱天冬酶 3 活性增加 50 倍，磷脂酰丝氨酸外化增加 4 倍，以及 5-和染色质浓缩和 DNA 亚倍体分别增加 15 倍[2]。

细胞实验溶解度：

DMF 中的溶解度 : 10 mg/mL (33.33 mM）；H2O 中的溶解度 : 1 mg/mL (3.33 mM)。超声助溶 (<60°C); DMSO can inactivate Cisplatin's activity

动物实验溶解方案：

以下溶解方案，请直接配制工作液。建议现用现配，在短期内尽快用完。

方案 一

请依序添加每种溶剂： PBS

Solubility: 0.91 mg/mL (3.03 mM); 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C)

方案 二

请依序添加每种溶剂： Saline

Solubility: 2 mg/mL (6.67 mM); 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C)

方案 三

请依序添加每种溶剂： 0.5% CMC-Na/saline water

Solubility: 20 mg/mL (66.66 mM); 悬浊液; 超声助溶

Help & FAQs

为什么不建议用 DMSO 溶解呢？

DMSO 会使顺铂失活，参考文献 PMID: 24812268。

必须避光吗？实验室没有避光 EP 管，影响使用吗？

是的，需要避光保存，也可以用铝箔包一下。