性能验证与实验室精密度｜做值得信赖的化学发光（七）

体外诊断检测，是循征医学非常重要的组成部分，为临床医生提供有效信息，用于疾病的诊断和治疗效果监测。其中，化学发光免疫检测试剂是当前体外诊断领域的主流产品，广泛服务于医院及其他医疗机构，用于疾病的辅助诊断。随着技术的不断革新，市场上化学发光免疫检测试剂产品层出不穷，品牌百花齐放，如何评价产品质量是摆在实验室人员面前的首要问题。

化学发光免疫检测产品最终目的是服务于临床应用，为医生和患者提供优质的服务，因此在新产品研发阶段不仅要对反应体系、试剂配方、工艺参数进行充分的研究和确认，同时科学、完整的产品性能验证与有效、充分的临床确认也是产品质量保证的关键部分。

通常，体外诊断试剂产品性能评价包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度、精密度、抗干扰实验、稳定性、钩状效应、携带污染和参考区间等。其中，精密度是一个试剂产品性能得以保证的基础，缺少合格精密度的产品，其他性能都无法得到真实、稳定的发挥。

精密度分为：

可重复性（repeatability）

批间精密度（between-run precision）

日间精密度（within-day precision）

天间精密度（between-day precision）

室内精密度（within-laboratory precision）

医学检验实验室日常工作中更关注的是可重复性和室内精密度，体现试剂、仪器、质量控制等综合因素，是病人样本报告精密度的直接体现，也是对数据长周期波动的监控指标之一。

我们的实验室精密度验证方案是以美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP5-A2指南为主体，结合国内注册法规、国/行标、欧盟IVDR法规等规范综合构建的一套科学、有效的分析性能验证评估方案和验证体系。在实际临床运用中，会受到样本、环境的状态影响，因此我们的评估模型在基础的平衡嵌套设计模型（20天*2批*2重复、3个实验室*5天*1批*5重复）上增加3个批次、3个操作者、3台仪器、更多的样本数量、3个实验室及竞品等影响因素做综合评估分析（图1）。

图1  实验精密度模型

实验室精密度验证步骤

1

样本准备

样本基质根据说明书宣称类型选择，我们主要使用天然混合血清、血浆、尿液、校准品、商用质控品（Bio-Rad）等；

样本浓度设置3个水平，线性区间的低、中、高浓度（包含CO值）；

确定样本稳定性，实验样本配制后进行-80℃冻存后反复冻融3次检测，确定样本稳定性无明显变化。

2

测试干扰因素

测试20天，每天2轮，不同的实验室、仪器、试剂批、校准品批号、校准周期、操作者、温度和湿度来测试。

3

数据分析

使用Grubbs检验进行离群值剔除，使用平衡方差分析的结果计算重复性的变异系数（%CVr）、实验室内精密度的变异系数（%CVwl）。

根据化学发光试剂的方法学、项目分类、灵敏度等不同，选择7个代表项目（TSH/FT3/Anti-TG、E2/β-HCG、NT-proBNP/hs-cTnI），使用Bio-Rad质控品作为样本分别在自有仪器平台EXI2400、EXI1800、行业主流厂家（A、B、C、D）引用标准验证流程，测试20天后做详细的分析。在多个厂家封闭系统中比对结果如图2，3所示，EXI2400多项目的重复性（%CVr）＜2.5%，实验室内精密度（%CVwl）＜4.5%，水平位于行业前列。EXI1800在多项目的重复性（%CVr）＜4.0%，和实验室内精密度（%CVwl）＜6.0%，在国产同类小型化学发光免疫分析仪中位于前列。此份比对结果帮助我们评估临床风险和了解自身产品在行业中的水平，并激励我们持续优化试剂。

图2  多厂家的重复性的变异系数（%CVr）汇总

图3  多厂家的实验室内精密度的变异系数（%CVwl）汇总

通过构建一套科学、有效的分析性能验证评估方案和验证体系，综合评估分析检测试剂的室内精密度，为开发性能优越、质量可靠的化学发光免疫检测产品奠定基础，为中国化学发光免疫技术的提高、突破和领先，尽绵薄之力。做值得信赖的化学发光产品，我们一直在努力。

技术部分讲述：中元汇吉化学发光研发总监

编辑：管佩钰  审校：方 琪