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小鼠热水浴实验(Hot Water Tail Immersion Test)是一种用于评估镇痛药物效果或研究痛觉反应的实验方法。该实验通过测量小鼠在热水中的尾巴撤回潜伏期来评估痛觉阈值的变化。热水浴实验利用了小鼠本能的逃避热刺激的反应。当小鼠的尾巴接触到热水时,会迅速缩回,这一反应时间称为潜伏期(Latency)。通过比较给药前后潜伏期的变化,可以评估药物的镇痛效果。
实验过程:
准备好热水浴设备,通常是一个带有温度控制器的容器,以确保水温恒定。水温一般设定在50-55℃之间,具体温度可以根据实验要求调整,但需确保不会对小鼠造成不可逆的伤害。
将小鼠轻轻地固定住,仅将尾尖浸入热水中。记录小鼠第一次尝试缩回尾巴的时间(潜伏期)。为了避免组织损伤,潜伏期一般不超过10秒,如果超过这个时间,应立即终止实验,将尾巴移出热水。对每只小鼠进行4次基线测量,记录将尾巴浸入51°C热水中至尾巴抽动的时间(以秒计);丢弃第一次测量结果,剩余3次测量结果取平均值作为基线反应。在药物处理后2、5、10、20和30分钟时测量尾巴抽动潜伏期。通过将测量值除以平均基线反应进行标准化。给小鼠药物处理后有足够的等待时间(如30分钟至数小时)再测试。再次测量小鼠尾巴接触热水时的潜伏期。
小鼠使用异氟烷(isoflurane)麻醉,将小鼠左足前半爪浸没在60℃热水当中30s,之后允许小鼠休息5min,开始录像,每只记录30min。录像结束后计数小鼠在30min之内的舔足时程。由于水温60℃较高,小鼠在实验之后需尽快处死,否则三天内会出现坏死现象。
Fig1 未进行尾部活组织检查的小鼠热水浸泡尾巴抽动潜伏期的治疗效果
数据分析:
对比给药前后的潜伏期,如果潜伏期显著延长,则说明药物具有镇痛效果。
计算潜伏期的变化百分比或绝对值,并进行统计分析。
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文献引用:
Jones CP, Carver S, Kendall LV. Evaluation of common anesthetic and analgesic techniques for tail biopsy in mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 2012 Nov;51(6):808-14.
Jones CP, Carver S, Kendall LV. Evaluation of common anesthetic and analgesic techniques for tail biopsy in mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 2012 Nov;51(6):808-14.
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