tNGS建库实验又又又被气溶胶污染了?
加班做实验,何时实现全自动化?
UDG防污染只能防一轮,全流程防护难?
tNGS具有极高的检测灵敏度,气溶胶污染的控制是保证tNGS检测结果真实准确的必要前提。然而,多重扩增过程的气溶胶污染至今仍是一大挑战,缺乏有效应对策略。诺唯赞革新技术,创新性地开发出Assemplex多重扩增技术,并推出了基于该技术的全新一管式tNGS建库方案,从源头攻克污染难题,助力病原体精准检测!
Assemplex技术:
突破一管式tNGS建库技术
在探索一管式扩增解决方案的过程中,核心难题在于:Index和Panel混合的一管式扩增时,难以在靶标有效扩增和完整文库占比之间取得平衡,导致整体扩增效果不佳,引物二聚体问题严重,有效文库占比很低。此外,高特异性的多重扩增模块在扩增速度和效率上也存在明显不足,无法在一轮扩增中完成文库构建。
为攻克这一技术瓶颈,诺唯赞打破传统两步法扩增的思维定式,创新性地开发出Assemplex技术;同时,对多重扩增酶进行定向进化,成功实现了一管式tNGS建库,在保证优异扩增特异性的同时,解决气溶胶污染问题。
解决方案亮点展示
一管式
一步完成文库构建,有效避免气溶胶污染
高灵敏
投入可低至5拷贝,有效扩增低载量病原
严控菌
生产工艺再升级,背景菌控制更加严格
测试数据展示
01 高文库产出:
基于新升级的多重扩增模块,在不同拷贝数下(5、20、50、100、200拷贝),UNA331一管式产出较UNA312两步法提高3 - 8倍。
图1. 一管式和两步法建库产出对比
02病原检测灵敏度大幅提升:
针对人基因组设计200重panel,以其中25重靶标的扩增纯化后产物作为靶标模板,使用不同比例的ddH2O进行稀释,分别获得5、20、50、100、200 拷贝的中间母液,并均掺入10 ng植物DNA作为背景核酸,参照两步法和一管式程序进行文库构建。结果显示,UNA331一管式的靶标检出reads占比显著优于UNA312两步法。
图2. 病原检出灵敏度测试
03背景核酸低:
一管式tNGS产品使用全新升级的背景核酸控制工艺,并通过对“人、机、料、法、环、测”各个维度的严格控制,保证tNGS检测的准确性。
图3. 控菌工艺升级前后背景菌数量检测结果
诺唯赞一管式tNGS建库试剂盒,突破了一步法tNGS建库技术难题,不仅大幅简化了原两步法建库实验的操作流程,还从源头上解决了tNGS实验气溶胶污染的行业难题,保证实验结果准确性的同时提升了建库效率,为病原体检测提供更优解决方案。
诺唯赞tNGS新品即将上线,敬请期待!
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