线虫行为实验专题丨线虫脂肪堆积模型及相关评估

重点推荐

线虫培养：

以初始给药时间记为第0天，每组实验均采用同期化的雌雄同体L4期线虫，置于涂有OP50菌液的NGM固体平皿表面于20℃培养。实验过程中每天转移线虫至新鲜培养皿中，以保持食物充足。

线虫寿命测定：实验选取同期化线虫100只/组，每24h转移线虫至对应实验组新鲜培养基，以挑虫器触碰线虫无反应视为死亡，观察并记录线虫的存活情况，绘制线虫生存曲线。

线虫产卵量测定：实验选取同期化线虫5只/组，每24h转移至新板中直到这5只线虫均不产卵。含有子代的平板3d后统计成虫数，并计算平均值作为亲代线虫的产卵量。

线虫吞咽能力测定：实验选取同期化线虫5只/组，显微镜下统计线虫咽部收缩情况，每次跟踪1只计时1min，计算平均值。每天统计一次直到线虫生命晚期。

线虫运动能力测定：实验选取同期化线虫70只/组，每24h转板并统计处于以下4种不同状态的线虫数：1）正常运动状态；2）运动迟缓状态；3）停止运动状态；4）死亡状态。以上实验每组重复3次作为平行实验。

构建线虫脂肪堆积模型

为筛选出最佳质量浓度的高糖诱导条件，分别设置空白组Control，2％D－glu组，3％D－glu组，4％D－glu组进行葡萄糖诱导条件处理，观察线虫的成活率及生理指标评估，确定最佳糖诱导质量浓度。

组织中的脂质含量检测

油红O染色是一种常用的组织化学染色技术，用于检测和定量组织中的脂质含量。在评估药物对线虫降血脂作用的研究中，油红O染色法可以帮助研究者观察和量化线虫体内脂肪沉积的变化。例如，使用油红O染色法对秀丽隐杆线虫肠道脂滴进行染色，可观察线虫体内脂肪沉积的变化。通过油红O染色可以直观地看到线虫体内的脂质堆积情况，从而评估药物对线虫脂质代谢的影响。油红O染色法还可用于观察姜黄素对秀丽隐杆线虫降脂及抗氧化保护作用的影响。油红O染色法因其能够对活体线虫的脂滴进行染色，在评估药物对线虫降血脂作用的研究中发挥了重要作用。

线虫运动状态及吞咽频率检测

喂食线虫糖质量浓度越高，对线虫的正常运动影响越明显；

体外糖质量浓度的升高对线虫吞咽能力未呈现抑制作用。喂食初期实验组产卵量低于空白组，随喂食时间的延长，7d后实验组产卵量高于空白对照组。体外糖诱导对线虫寿命、运动能力及产卵量均有不同程度的影响，对线虫吞咽能力未呈现显著抑制现象。