实验原理优品生物的小鼠单克隆抗体IgG六种亚型鉴定试剂盒采用经典的酶联免疫吸附测定法(ELISA)。该方法利用抗体与抗原特异性结合的特性,通过标记酶催化显色反应,从而完成样本中不同亚型抗体的检测与鉴定。
试剂盒组成包被板:预包被抗小鼠IgG亚型抗体的96孔酶标板。标准品:针对IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3和IgG4的标准品。样本稀释液。酶结合物:HRP标记的二抗,用于信号放大。洗涤液。显色液:TMB显色底物。终止液:稀释的硫酸溶液。说明书:详细的操作指导。操作步骤样本准备:将小鼠的血清、血浆或细胞培养上清等样本进行适当的稀释和处理,确保样本质量符合试剂盒的检测要求。根据样本类型,进行适当的稀释
例如,杂交瘤细胞上清可稀释至1:100,腹水可稀释至1:100000。加样与孵育:将处理后的样本依次加入预包被的微孔板中,加入相应的标记抗体。
在适当的温度和湿度条件下进行孵育,让抗原与抗体充分结合。洗涤与显色:使用洗涤液彻底清洗微孔板,去除未结合的试剂。加入底物液进行显色反应,观察颜色变化。结果判定:使用酶标仪读取各孔的吸光度(OD值),根据标准曲线或设定的阈值判定样本中抗体亚型的含量。注意事项试剂盒应在2-8℃条件下储存,避免冻结和长时间暴露于高温环境。实验过程中应严格遵守无菌操作规范,防止交叉污染。使用前应检查试剂的有效期,确保实验结果的可靠性。如有任何疑问或技术问题,请及时联系技术支持团队
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