优品生物的 HV-IgG 抗体高灵敏度检测系统即人汉坦病毒 IgG 抗体(HV-IgG)检测试剂盒,以下是其相关介绍:
检测原理
采用间接两步法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理。在预包被汉坦病毒蛋白(HV)(固相抗原)的微孔酶标板中,加入阴阳性对照和待测样本,经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,再加入抗人 IgG-HRP(酶标抗体),再次温育与充分洗涤后,在微孔板固相表面形成固相抗原 - 抗体 - 酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产生蓝色产物,在终止液作用下,最终转化为黄色,用酶标仪测定吸光度(OD 值),吸光度与待测样品中待测抗体的浓度呈正相关,据此判断阴阳性。
试剂盒特点
高灵敏度与特异性:采用优质抗体,能够识别天然和重组人汉坦病毒 IgG 抗体,与结构类似物无交叉反应,可准确检测低浓度的抗汉坦病毒 IgG 抗体,避免漏检,确保检测结果的准确性。
操作简便:预包被微孔板,优化试剂体系,试剂盒组分齐全,包括阴阳性对照、包被微孔板、HRP 标记抗体、底物液、样本稀释液等。所有试剂和组分在使用前恢复至室温即可使用,实验流程有详细操作指南,还支持自动化洗板机,减少操作步骤,降低操作难度。
快速高效:实验流程仅需 2-3 小时,能快速得出检测结果,适合批量样本检测,满足临床诊断和疫情防控的时效性需求。
稳定可靠:严格的质控标准,2℃-8℃保存有效期 6 个月。批内变异系数 CV% 小于 10%,批间变异系数 CV% 小于 15%,确保实验结果的可重复性。
操作步骤
样本准备:采集人血清或血浆样本,避免溶血或脂血样本。样本可在 2-8℃保存 7 天,长期保存需置于 - 20℃。
试剂准备:将所有试剂恢复至室温(18-25℃),轻轻混匀,按需配制洗涤液(1:25 稀释)。
加样与孵育:分别加入标准品、质控品和待测样本至预包被微孔板中,每孔 100μL,覆上板贴,37℃孵育 60 分钟。
洗涤:弃去孔内液体,每孔加入 300μL 洗涤液,静置 30 秒后弃去,重复 5 次。
加酶标抗体:每孔加入 100μL 酶标抗体,37℃孵育 30 分钟。
再次洗涤:重复洗涤操作。
显色:每孔加入 100μL TMB 显色液,37℃避光孵育 15 分钟。
终止反应:每孔加入 50μL 终止液,轻轻混匀。
读数:使用酶标仪在 450nm 波长下测定各孔吸光度(OD 值)。
结果判读
计算标准品和样本的 OD 值。
以标准品浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,绘制标准曲线。
根据标准曲线计算样本中 HV-IgG 抗体的浓度。
阴性对照 OD 值小于 0.25,阳性对照 OD 值大于 0.8,阳性判断(Cut-Off 值)为阴性对照 OD 值 + 0.35,样本 OD 值大于阈值判定为阳性,反之则为阴性。样本测试为阳性的最大稀释倍数即样本的滴度。
应用领域
疾病诊断:可作为诊断汉坦病毒感染的重要工具,帮助医生快速判断疑似患者是否感染汉坦病毒。
病情监测:在患者治疗过程中,定期监测抗体水平变化,为医生调整治疗方案提供参考,有助于评估治疗效果,提高治愈率和生存率。
流行病学调查:在汉坦病毒流行地区,通过对大量人群进行血清学筛查,检测 HVIgG 抗体阳性率,可了解人群的感染率和感染分布情况,为制定防控措施提供数据支持。
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