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3 小时出结果!大鼠 IgG2c 检测—— 优品生物试剂盒实测

在众多涉及大鼠的科研实验中,比如构建大鼠的自身免疫性疾病模型(如类风湿关节炎模型),IgG2c 水平的变化是评估疾病发展和治疗效果的关键指标。然而,传统的 IgG2c 检测方法让科研人员头疼不已。

从时间维度来看,传统检测流程漫长。以常见的酶联免疫吸附试验(ELISA)为例,仅抗原包被这一步,就需要在特定条件下花费数小时,之后还需进行长时间的封闭操作,以防止非特异性结合。整个检测过程往往需要耗费 6 - 8 小时,甚至因为操作步骤的繁琐,常常导致实验不得不跨日进行,大大拉长了实验周期。

在操作方面,其复杂性也给科研人员带来极大挑战。由于 IgG2c 与其他免疫球蛋白亚型(如 IgG2a)结构相似,传统检测方法的特异性较差,极易出现交叉反应。为了尽量减少这种干扰,科研人员不得不增加额外的封闭步骤,并且在洗涤过程中需要格外小心,严格控制洗涤次数和条件。但即便如此,新手科研人员在操作过程中仍常常因为某个环节的失误,导致检测数据出现偏差,前功尽弃。例如,在某高校的一项大鼠免疫实验中,一位研究生在使用传统方法检测时,由于洗板操作不当,使得 30% 的样本出现假阳性结果,整个实验被迫重新进行,浪费了大量的时间和样本资源,课题进度也因此延误了 2 周之久。

二、优品生物试剂盒:创新技术带来的变革

创新技术 1:预包被 “捕获矩阵”

优品生物试剂盒在设计上独具匠心,采用了预包被技术。其微孔板上预先包被了经过精心筛选和验证的大鼠 IgG2c 特异性单抗。这些单抗经过 6 种大鼠免疫球蛋白亚型交叉验证,与 IgG2a 的交叉反应率极低,小于 0.5%,确保了检测的高度特异性。这一创新设计使得科研人员在使用试剂盒时,无需再进行繁琐的抗原包被和封闭步骤,拿到试剂盒即可直接进行样本检测,极大地简化了操作流程。同时,试剂盒配套的酶标二抗也是即用型的(HRP 标记抗大鼠 IgG2c),科研人员无需再进行复杂的稀释操作,直接加样即可,进一步节省了时间和精力。

创新技术 2:“两步法” 缩短孵育时间

在孵育环节,优品生物试剂盒采用了优化的 “两步法”。第一步,将血清或腹水样本按照 1:100 的比例稀释后,放入 37℃孵箱中孵育,仅需 30 分钟,而传统方法通常需要 60 分钟。这得益于试剂盒对抗体与抗原结合条件的优化,使得在较短时间内就能达到高效结合。第二步,加入酶标二抗后,孵育时间同样大幅缩短至 45 分钟,相比传统方法的 90 分钟,时间压缩了 40%。同时,在孵育结束后,同步完成显色过程,使用 TMB 底物显色仅需 8 分钟,整个过程高效流畅。

三、实测数据:速度与精度的完美呈现

实测场景:CIA 模型大鼠检测对比

为了全面评估优品生物试剂盒的性能,我们选取了 20 只处于胶原诱导关节炎(CIA)模型第 21 天的大鼠,同时使用优品试剂盒与进口某知名品牌(A 品牌)试剂盒进行 IgG2c 检测对比。

在阳性样本符合率方面,优品试剂盒表现出色,达到了 100%(20/20),准确检测出了所有阳性样本。而 A 品牌试剂盒的阳性样本符合率为 90%(18/20),存在漏检情况。在批内 CV 值(反映检测重复性的指标)上,优品试剂盒仅为 4.2%,表明其检测结果的重复性极佳;A 品牌试剂盒的批内 CV 值则为 7.8%,相对较高。在检测时间上,优品试剂盒从样本处理到得出结果,仅需 98 分钟,而 A 品牌试剂盒则需要 185 分钟。此外,在操作失误率方面,我们安排了 5 位新手科研人员使用优品试剂盒进行重复操作,结果操作失误率为 0%;而在使用 A 品牌试剂盒时,10 个孔中有 2 个出现污染,操作失误率达到 20%。

交叉反应验证:精准区分不同亚型

为了验证优品生物试剂盒对 IgG2c 的特异性,我们进行了交叉反应验证实验。对含有大鼠 IgG1、IgG2a、IgG2b 亚型且浓度均为 10μg/mL 的血清样本进行检测,优品试剂盒表现出零交叉反应,其 OD 值均小于 0.1。同时,对小鼠 IgG2a 样本(浓度 10μg/mL)进行检测时,OD 值仅为 0.08,远低于临界值 0.2,这充分证明了该试剂盒能够完美区分种属差异以及不同的免疫球蛋白亚型,确保了检测结果的准确性和可靠性。

四、操作实录:新手也能轻松上手

为了进一步验证优品生物试剂盒操作的简便性,我们邀请了一位大二本科生,这是他首次接触 ELISA 相关实验。在整个操作过程中,他首先按照试剂盒说明书将样本按 1:100 稀释,然后向预包被板上已标注好的孔位中每孔加入 100μL 样本。完成加样后,将板子放入 37℃孵箱孵育 30 分钟,孵育结束后使用自动洗板机进行 3 次洗板操作,整个过程无需手动甩板,操作简单便捷。接着加入酶标二抗,孵育 45 分钟后,加入 TMB 显色剂,8 分钟后显色反应完成,使用酶标仪读取数值。

这位学生反馈:“这次实验体验和我在实验课上学到的 ELISA 操作完全不同,这个试剂盒太简单易用了。不用去记复杂的包被浓度,洗板次数也少,显色的颜色很明显,而且 3 小时就能看到结果,终于不用像以前那样熬夜等实验结果了!”

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  • 原文链接https://page.om.qq.com/page/OUEd_h0t8OX_IlWbIC9Y_9wg0
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