出版日期:2024年
发表刊物:《安徽中医药大学学报》
论文作者:刘利娜,王仁中,吴丝雨,金传山
桑黄,作为一种传统的药用真菌,在《神农本草经》中就有记载,被誉为“桑耳”。它在免疫调节、抗炎、抗肿瘤、降血糖等方面展现出显著的生物活性。多糖作为桑黄的主要活性成分,广泛存在于其子实体、菌丝体及发酵液中,成为研究和开发的热点。本研究聚焦于从瓦尼桑黄中分离纯化多糖,深入探究其结构特征及体外抗炎活性,为桑黄资源的高效利用及多糖产品的开发提供理论依据。
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研究采用水提醇沉法获取桑黄粗多糖(SHP),再利用DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100色谱柱进行分离纯化,最终得到两种均一酸性多糖:SHP-1-1和SHP-2-1。这一过程不仅提高了多糖的纯度,为进一步的结构分析和活性研究奠定了基础。
结构特征分析
分子量测定
通过凝胶渗透色谱-示差多角度激光散射(GPC-RIMALS)分析,SHP-1-1的重均分子量为333.599 kDa,SHP-2-1为563.032 kDa。二者均展现出较宽的分子量分布,表明其为高度异质的多糖。
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单糖组成分析
离子色谱法检测结果显示,SHP-1-1由岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,摩尔比为11.48:0.18:0.28:17.86:27.71:0.64:11.75:0.94;SHP-2-1则由岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,摩尔比为0.73:0.14:0.32:1.13:14.96:1.04:3.79:1.50。这表明两种多糖在单糖组成上存在差异。
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FT-IR分析
傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析显示,SHP-1-1和SHP-2-1在3382 cm⁻¹和2925 cm⁻¹附近有羟基和亚甲基的吸收峰,在1622 cm⁻¹和1421 cm⁻¹附近有糖醛酸的特征吸收峰,证明样品中存在糖醛酸。此外,SHP-1-1主要存在α糖苷键,而SHP-2-1主要存在β糖苷键。
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SEM分析
扫描电子显微镜(SEM)观察发现,SHP-1-1呈不规则片状,表面相对光滑;SHP-2-1则呈不规则碎片状,表面粗糙且有结晶状凸起。这种微观结构的差异可能与其分子间受力和晶体结构不同有关。
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抗炎活性研究
细胞活力测定
在10~400 μg/mL浓度范围内,SHP-1-1和SHP-2-1对RAW264.7细胞无明显细胞毒活性,且在10~100 μg/mL范围内能显著提高细胞活力,呈现剂量依赖性。
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抑制炎症因子释放
研究发现,SHP-1-1和SHP-2-1均能降低LPS诱导的RAW264.7细胞中NO、TNF-α、IL-6和IL-1β的水平。其中,SHP-2-1的半抑制浓度(IC₅₀)较SHP-1-1低,表明其抑制作用更强。SHP-1-1在抑制IL-6分泌方面表现出色,而SHP-2-1则在抑制NO释放和IL-1β分泌方面更具优势。
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结论
本研究成功从瓦尼桑黄中分离纯化出两种具有抗炎活性的均一多糖SHP-1-1和SHP-2-1,并对其结构进行了详细分析。这些多糖在体外实验中展现出良好的抗炎效果,为瓦尼桑黄的开发和利用提供了重要参考。未来的研究可以进一步探索这两种多糖在体内的抗炎作用机制,以及它们在其他炎症相关疾病模型中的应用潜力,为开发新型抗炎药物或功能性食品提供更有力的科学支持。
★ 本文章由千济方桑黄医学研究院整理,仅供学术交流,欢迎指正。
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