近日,随着生物医药领域的快速发展,兔单抗筛选技术因其独特的优势在抗体研发中崭露头角。兔单抗以其高亲和力、高特异性和广泛的多样性,成为科研、诊断和治疗中的重要工具。
科学与技术
兔单抗筛选技术通过免疫兔子,利用其独特的免疫系统产生高特异性的单克隆抗体。兔子的B细胞在抗原刺激下持续发生基因重排,促进了B淋巴细胞的扩增和多样性。与传统的杂交瘤技术和噬菌体展示技术相比,兔单抗筛选技术具有更高的筛选效率和更广的抗体多样性。
兔单抗开发流程
兔子经过免疫后,在体内免疫系统的作用下使得抗体成熟,分离兔子脾脏,将抗原和脾脏细胞共孵育,筛选到抗原特异性B细胞,然后经过两周的B细胞培养,Elisa方法鉴定得到阳性B细胞克隆,对阳性克隆进行RNA抽提和cDNA的制备,PCR扩增抗体序列并测序,最终得到抗体序列。
筛选流程
免疫兔子:兔子经过多次免疫后,体内产生高亲和力的抗体。免疫周期包括初次免疫、二次免疫、三次免疫等,每次免疫后采集血清进行效价检测。
B细胞筛选:免疫成功后,取兔子的脾脏制备单细胞悬液,分选靶点特异的B细胞。每个B细胞经过两周的培养后,通过Elisa或流式细胞仪检测克隆上清,筛选出阳性克隆。
抗体序列测序:对阳性克隆进行RNA提取和cDNA制备,通过PCR扩增抗体序列并进行测序,最终获得抗体序列。
服务案例
1, 筛选流程
对免疫成功的兔子,取脾脏,并制备成单细胞悬液。分选靶点特异的B细胞,每个孔中加入一个B细胞进行培养。经过2周的细胞培养,通过Elisa或流式细胞仪检测克隆上清。得到的阳性克隆通过PCR扩增抗体序列。
2,抗体筛选结果分析
单个项目可进行20个以上的96孔板培养,起始B细胞可达到2000个以上,特殊项目可进行10000个以上细胞的培养,增加抗体的多样性;
优化的B细胞培养体系,可以使得阳性克隆率在10%以上,单个项目可以获得Elisa阳性克隆200个以上;
结合数据库,并根据RACE测序结果,设计的扩增引物尽可能包含所有FRI和FR4序列,使得阳性克隆抗体序列获得率接近100%。
3,交付内容
兔单抗筛选报告
抗体序列测序报告
重组表达抗体
带有抗体序列的T载体或表达载体
技术优势
高亲和力:兔单抗的解离系数可达到皮摩尔级,远高于鼠单抗。
高特异性:兔单抗能识别更多的抗原表位,包括蛋白的翻译后修饰和小分子化合物。
多样性广:兔单抗的CDR3较长,增加了抗体的多样性,适用于多种科研和诊断需求。
应用前景
兔单抗在科研试剂、诊断原料和治疗抗体等领域具有广泛的应用前景。特别是在识别鼠源蛋白和开发高灵敏检测试剂方面,兔单抗展现出独特的优势。此外,兔单抗还可用于修饰抗体、小分子化合物抗体和单个核苷酸抗体的开发。
发展和展望
随着兔单抗筛选技术的不断优化,其在抗体研发中的应用将更加广泛。未来,兔单抗有望在生物医药领域发挥更大的作用,为疾病诊断和治疗提供更多可能性。
元莘生物竭诚为国内外制药公司、医疗机构和科研院所等提供修饰抗体制备、多抗体制备等服务,提高和改善现有癌症、自身免疫性疾病、感染性疾病以及其他疾病的治疗和诊断手段。
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