脑声问答（121）期丨检测小鼠撒尿频率方法总结

好书推荐！《动物行为实验指南》电子版pdf，网盘发货

《动物行为实验指南》共674页，涵盖了常见的实验动物，如小鼠、大鼠和斑马鱼，详细描述了每一种行为测试的实验设计、测试设备、实验流程、评估指标、预期结果、常见问题及解决方法、数据分析、模型应用与局限性等各个方面。它通过快速引导，帮助研究人员高效地掌握实验的每个阶段，减少了查阅文献和寻找方法的时间，成为各类科研人员的重要参考资料。

《动物行为实验指南》共计收录了16种动物行为类型，包括焦虑抑郁、学习记忆、痛觉、运动、恐惧、社交、癫痫、操作、成瘾、视觉、痒觉、味觉、嗅觉、睡眠、斑马鱼行为以及常见动物模型等内容。每一类动物行为下，都详细介绍了多个经典的实验范式，涵盖了超过100种实验方法。

www.behaviewer.com

尿液标记法：

给小鼠注射或口服一种可在尿液中被检测到的标记物，然后通过检测标记物在尿液中的出现情况来确定撒尿频率。

选择合适的标记物，如荧光素钠等，按照适当的剂量给小鼠注射或口服。之后，将小鼠放在特定的观察区域，使用能够检测标记物的设备，如荧光显微镜或其他荧光检测仪器，定期观察小鼠尿液中标记物的出现情况。当检测到标记物时，即表示小鼠已经排尿，记录排尿的时间和次数，从而得到撒尿频率。这种方法可以较为准确地检测到小鼠的排尿行为，尤其是对于一些不易直接观察到的排尿情况，如在夜间或小鼠处于隐蔽位置时的排尿。

在代谢笼中收集尿液和粪便：

选取健康、体重相近、年龄合适的小鼠若干只。一般来说，实验小鼠应处于相同的生理状态，例如性别一致、未处于疾病或应激状态等，以减少个体差异对实验结果的影响。将小鼠放入饲养环境中，让其适应至少3-5天，以缓解运输或环境变化带来的应激反应。在此期间，提供正常的饮食和饮水，保持饲养环境的温度（22-25℃）、湿度（40%-60%）和光照（12小时光照/12小时黑暗）条件稳定。

将清洁、干燥的代谢笼组装好，确保尿液收集系统和粪便分离系统正常工作。将尿液收集容器连接到代谢笼的尿液出口处，并确保连接紧密，防止尿液泄漏。将适应环境后的小鼠轻轻放入代谢笼中，每笼一只，避免小鼠受到惊吓或伤害。同时，记录放入小鼠的时间，作为实验的起始时间。在代谢笼中放置适量的饲料和充足的饮用水，确保小鼠能够自由进食和饮水。记录饲料和水的初始重量或体积。 

收集尿液：在设定的时间段内（如24小时），定期观察尿液收集情况。一般来说，可以每隔一定时间（如4-6小时）检查一次尿液收集容器，记录尿液的体积和收集时间。如果尿液量较少，可以在实验结束后统一测量和记录。注意保持尿液收集容器的清洁，避免尿液被污染或蒸发。

除了尿液收集数据外，还需记录小鼠的饮食量、饮水量、体重变化等相关信息。在实验过程中，观察小鼠的行为、精神状态等，如有异常情况应及时记录。

实验时间结束后，小心地将小鼠从代谢笼中取出，放回原来的饲养环境中。注意观察小鼠的状态，确保其健康状况良好。立即对代谢笼进行清理和消毒，将尿液收集容器中的尿液进行处理（如按照生物安全规定进行无害化处理），清洗代谢笼的各个部件，并用酒精等消毒剂进行擦拭消毒。

数据分析：根据收集到的数据，计算小鼠在不同时间段内的撒尿频率（撒尿次数/时间）、平均尿量等指标。可以使用统计学方法分析不同组小鼠之间或同一组小鼠在不同条件下的撒尿频率差异，以评估实验因素对小鼠排尿行为的影响。

参考文献：

Ziegler AA, Grobe CC, Reho JJ, Jensen ES, Thulin JD, Segar JL, Grobe JL. Short-term Housing in Metabolic Caging on Measures of Energy and Fluid Balance in Male C57BL/6J Mice ( Mus musculus). J Am Assoc Lab Anim Sci. 2022 Mar 1;61(2):132-139.

Kennedy, B. Metabolic caging for animal research. Lab Anim 41, 171–176 (2012).

Roberts, Sarah A., et al. "Darcin: a male pheromone that stimulates female memory and sexual attraction to an individual male's odour." BMC Biology8.1 (2010): 75-75.

Nelson AC, Cunningham CB, Ruff JS, Potts WK. Protein pheromone expression levels predict and respond to the formation of social dominance networks. J Evol Biol. 2015 Jun;28(6):1213-24.