伦昌硕品牌专供：人脑源性神经营养因子检测解决方案

伦昌硕采用的是基于化学发光免疫分析（CLIA）技术的检测原理。在该技术体系下，将特异性针对人脑源性神经营养因子的抗体包被在磁性微粒表面，形成固相抗体。当样本加入到反应体系中时，样本中的 BDNF 与固相抗体发生特异性结合。经过充分孵育后，通过磁场分离，将未结合的物质去除。随后，加入用吖啶酯等化学发光物质标记的检测抗体，标记抗体与已结合在固相抗体上的 BDNF 进一步结合，形成 “磁性微粒 - 抗体 - BDNF - 标记抗体” 的免疫复合物。在反应体系中加入碱性过氧化氢溶液等发光启动试剂后，吖啶酯在碱性条件下被过氧化氢激发，产生高效化学发光反应。发光强度与样本中 BDNF 的含量呈正相关，通过高灵敏度的发光检测仪对发光强度进行精确测定，再结合标准曲线，即可准确计算出样本中 BDNF 的浓度。化学发光免疫分析技术相较于传统的酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，具有更高的灵敏度，能够检测到更低浓度的 BDNF；同时，检测线性范围更宽，可满足不同样本中 BDNF 含量差异较大的检测需求；并且检测过程自动化程度高，减少了人为操作误差，提高了检测结果的准确性和重复性。三、检测流程样本采集

血液样本：对于大多数临床和科研检测需求，血液是常用的样本类型。采用静脉采血方式，一般采集 3 - 5ml 外周静脉血，置于含有抗凝剂（如 EDTA - K2）的真空采血管中。采血过程需严格遵循无菌操作规范，避免样本污染。对于新生儿或特殊人群，可考虑采集足跟血，但血量相对较少，需采用专门的微量检测方法。

脑脊液样本：在某些神经系统疾病的诊断中，脑脊液样本能提供更直接的信息。通过腰椎穿刺术采集脑脊液，一般采集量为 2 - 5ml，采集后应立即送检，防止样本成分发生变化。

其他样本：在特定研究场景下，如研究神经组织局部 BDNF 表达情况，可能会采集脑组织活检样本等。此类样本采集需在专业手术操作下进行，对样本的保存和处理要求更为严格。

样本处理

血液样本处理：采集后的血液样本应在 2 - 8℃条件下尽快处理。将含有抗凝剂的血液样本以 3000rpm 离心 10 - 15 分钟，分离出血浆层，转移至干净的离心管中备用。若不能及时检测，血浆样本可在 - 20℃或 - 80℃条件下保存，但要避免反复冻融，因为反复冻融可能导致 BDNF 结构破坏，影响检测结果准确性。

脑脊液样本处理：脑脊液样本采集后，可直接进行检测。如需保存，同样可在 - 20℃或 - 80℃条件下冻存，但由于脑脊液中成分复杂且含量较低，对保存条件和检测时机要求更高。

组织样本处理：对于脑组织等组织样本，需先将样本在冰上用生理盐水冲洗干净，去除表面血迹等杂质。然后将组织剪碎，加入适量的组织裂解液，通过匀浆、超声破碎等方法充分裂解组织细胞，释放细胞内的 BDNF。裂解后的样本再以 12000rpm 离心 20 - 30 分钟，取上清液用于后续检测。

检测操作

准备工作：从冰箱中取出伦昌硕 BDNF 检测试剂盒，平衡至室温（18 - 25℃）。检查试剂盒内各试剂是否齐全、有无变质或污染现象。开启化学发光检测仪，进行预热和仪器校准，确保仪器处于正常工作状态。

加样：按照试剂盒说明书要求，在已包被好抗体的磁性微粒反应杯中依次加入标准品、质控品和处理好的样本。每个样本和标准品均需设置复孔，以提高检测结果的可靠性。加样过程需使用高精度移液器，确保加样量准确无误，避免产生气泡。

孵育：加样完成后，将反应杯放入孵育器中，按照设定的孵育条件（一般为 37℃孵育 30 - 60 分钟）进行孵育，使样本中的 BDNF 与固相抗体充分结合。孵育过程中需保证孵育器温度均匀稳定，避免温度波动影响反应效果。

洗涤：孵育结束后，将反应杯转移至自动洗涤仪中，用洗涤缓冲液进行多次洗涤，以去除未结合的物质。洗涤过程需严格控制洗涤次数和洗涤时间，确保洗涤效果，避免残留杂质干扰后续检测结果。

加标记抗体：洗涤完成后，向每个反应杯中加入适量的用化学发光物质标记的检测抗体，再次放入孵育器中孵育（一般为 37℃孵育 20 - 30 分钟），使标记抗体与已结合在固相抗体上的 BDNF 结合。

加酶结合物：孵育结束后，再次洗涤反应杯，然后加入酶结合物（如辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素），继续孵育（一般为 37℃孵育 15 - 20 分钟），形成稳定的免疫复合物。

发光检测：孵育和洗涤完成后，向反应杯中加入发光启动试剂，迅速将反应杯放入化学发光检测仪中，检测化学发光强度。检测仪会自动记录每个反应杯的发光值，并根据标准曲线计算出样本中 BDNF 的浓度。