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先天免疫系统在抵御微生物入侵以及启动炎症反应方面发挥着至关重要的作用。抗菌肽(antimicrobial peptides, AMP)是真核生物抵御细菌和真菌入侵的一种重要的进化上保守的防御机制。尽管存在多个类别的抗菌肽,LL-37是人类防御素家族中唯一的成员。LL-37除了具有抗菌特性外,还具有多种调节免疫系统的特性,这些特性可能会促进自身免疫疾病的发生。
LL-37是一种由37个氨基酸组成的阳离子肽,由丝氨酸蛋白酶以及中性粒细胞中的蛋白酶3(PR3)对18 kDa的人阳离子抗菌蛋白(hCAP18)C末端进行细胞外切割而生成。LL-37能够在溶液和脂质双层中形成聚集物,因此与其他抗菌肽不同,它能够免受蛋白水解降解。其正电荷使其能够优先与带负电的磷脂膜结合。此外,在膜相互作用过程中,LL-37主要呈现α-螺旋结构,从而使其疏水残基单向分离,这使得LL-37能够穿透膜,形成跨膜孔隙并导致细菌溶解。与胆固醇相关的细胞膜(例如哺乳动物中的细胞膜)能够免受LL-37的孔隙形成效应的影响;然而,这种效应可以通过更高浓度的肽来克服。此外,LL-37还作为趋化因子,对中性粒细胞、单核细胞和T细胞具有趋化作用。LL-37对蛋白水解降解具有显著的抵抗力,并且在一定程度上对哺乳动物细胞具有细胞毒性。研究表明,LL-37在血浆中的水平为25 – 250 ng/ml,并且在感染性疾病中会升高。
检测原理
Hycult的人LL-37酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种基于夹心ELISA的检测原理,体外定量检测血浆和细胞培养上清液中的LL-37。样本和标准品被固定在包被有特异性抗体的孔底。生物素标记的检测抗体将与捕获的人LL-37结合。链霉亲和素-过氧化物酶结合物将与生物素标记的检测抗体结合。链霉亲和素-过氧化物酶结合物将与底物四甲基联苯胺(TMB)发生反应。通过加入草酸终止酶反应。使用分光光度计测量450 nm处的吸光度。通过绘制吸光度与人LL-37标准品浓度的关系,获得标准曲线。与标准品同时运行的样本中的人LL-37浓度可以从标准曲线上确定。
产品详情
Hycult Biotech
Hycult Biotech是一家专注于设计、研发、生产以及销售抗体和其相关产品的公司,其特色产品是天然免疫及相关领域的免疫分析试剂,例如补体, 嗜中性粒细胞蛋白,TLP,清道夫受体以及急性期蛋白等。除此之外,Hycult Biotech公司也可以提供炎症反应和细胞损伤等方面的产品。
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