Synaptic System重组抗体在科学研究中的应用

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除极少数情况外，哺乳动物的IgG型抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链组成，它们通过二硫键相互连接。每条链都包含特定物种的恒定区和可变序列，可变序列决定了抗原结合特性，如亲和力和特异性 （图1） 。

科研中常用的抗体是多克隆抗体或单克隆抗体

图1：哺乳动物IgG由两条重链和两条轻链组成。重链和轻链均包含特定物种的恒定区和可变序列，这些序列负责目标识别。

多克隆抗体

多克隆抗体是由具有不同可变序列的抗体分子组成的混合物，因此它们的抗原结合特性也各不相同 （图2）。多克隆抗体通常是通过免疫动物的血清获得的。【动物免疫后，激活的B细胞分化为浆细胞，最终产生大量的可溶性抗体。这些高度特化的细胞携带了分泌抗体的遗传信息。】

为了收获尽可能多的含抗体的血清，通常会牺牲宿主动物，而浆细胞以及特定抗体的遗传信息也随之丢失。因此，所获得的抗血清是一种有限的资源。只有通过重新免疫更多的动物，才能获得新的抗血清，这不可避免地会导致一定程度的批次差异，无论新材料经过多么严格的验证。

单克隆抗体

单克隆抗体由具有相同抗原识别特性的相同抗体分子组成 （图3）。1975年，引入了杂交瘤技术。在此方法中，将产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞系融合，以生成所谓的杂交瘤细胞，这些细胞可以无限繁殖。每个杂交瘤克隆产生的抗体都具有相同的特性。这种技术的优势显而易见。不再需要每次从头开始广泛表征和验证新的抗血清批次。无需费力地调整协议以适应变化的抗体特性。随着时间的推移，科学界积累的验证数据保持有效，并导致一种越来越被表征且有价值的研究试剂。然而，即使是通过杂交瘤技术产生的单克隆抗体也存在一定的局限性。它们可能会发生遗传转移，从而导致特异性和亲和力的不期望变化。一般来说，单克隆抗体的遗传信息是未知的，必须通过谨慎的细胞库管理来最小化抗体特性的变化。一些杂交瘤细胞系可能会变得不稳定，停止表达抗体。

重组抗体

重组抗体是通过使用已知抗体编码基因在体外生产的单克隆抗体。可以通过杂交瘤测序获得抗体的重链和轻链的编码序列。将这些序列克隆到表达载体中，并将其转染到哺乳动物宿主细胞系中以表达抗体。可以生成稳定转染的细胞克隆，并调整和优化表达。

一旦抗体被克隆，就可以对其进行改造。可以通过突变可变序列来改变结合特异性和亲和力。可以将一个物种的恒定区替换为另一个物种的恒定序列，从而产生嵌合重组抗体（图4）。这些经过基因工程改造的嵌合重组抗体保留了原始抗体克隆的所有抗原识别特性（图5）。

图4：通过将单克隆抗体的恒定区替换为另一个物种的恒定序列，获得嵌合重组抗体。

重组抗体与单克隆抗体相比具有以下优势

它们是在高度定义和控制的条件下生产的无限资源，批次间差异极小。从细胞培养上清液中纯化时无需牺牲动物。序列是已知的，因此抗体不会因遗传转移而发生变化。相反，有多种抗体工程选项可用于根据特定实验需求调整抗体。Synaptic Systems提供了一个不断增加的嵌合重组抗体系列，其恒定区来自兔子、豚鼠、大鼠、人类和鸡。它们都源自表现良好的小鼠或大鼠单克隆抗体，并且可以与常规的物种特异性二抗结合使用。因此，它们是您手中有价值且可靠的研究工具，具有卓越的性能。

IHC 大鼠脑

图5：嵌合重组抗体保留了其原始单克隆抗体的所有抗原结合特性，如代表性实验的比较实验图所示。IHC图像显示了用单克隆小鼠抗IBA1抗体234 011和源自IBA1抗体234 011的嵌合重组鸡抗IBA1抗体234 009对大鼠脑切片进行的免疫染色（IBA1 =红色，DAPI =蓝色）。

IHC-P 小鼠脑

图5a：IHC-P图片展示了利用单克隆小鼠抗VGLUT2抗体135 421和新出现的嵌合重组豚鼠抗VGLUT2抗体135 418对小鼠脑切片进行的间接免疫染色（VGLUT2 =棕色，苏木精=蓝色）。

ICC 神经元

图5b：在ICC实验中，使用c-Fos抗体226 017（大鼠单克隆）和c-Fos抗体226 008（兔重组）对大鼠海马神经元进行间接免疫染色（c-Fos =红色，MAP2 188 002（多克隆兔抗血清）和MAP2 188 011（单克隆小鼠纯化IgG）=绿色，DAPI=蓝色）。

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