Science子刊 | 病死率达30％！上海兽医所在19个省份检出日本脑炎病毒，羊成为新宿主

日本脑炎（Japanese Encephalitis, JE）是由日本脑炎病毒（JEV）引起的致命传染病，在亚洲及澳洲地区每年导致数万人感染，病死率高达20%-30%。传统观点认为猪和涉禽类动物是JEV的主要扩增宿主，病毒通过蚊媒在动物与人类之间传播。

《Science Advances》期刊最新发表的研究论文：Sheep serve as amplifying hosts of Japanese encephalitis virus, increasing the risk of human infection揭示了绵羊同样具备成为JEV扩增宿主的能力，这一发现在无养猪产业的农村地区尤其值得警惕，可能预示着病毒传播新途径的形成。

溯源突破：羊脑分离JEV

2022年8月，上海某羊场中200只一月龄湖羊突发异常，11只幼羊出现绕圈、共济失调等神经症状，发病率达5.5%。中国农业科学院上海兽医研究所团队迅速介入调查，对病羊脑组织样本开展组织病理学检测，发现具有典型日本脑炎病毒（JEV）感染特征的淋巴组织细胞性血管周围套病变。

通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）全面筛查多种病原体，仅JEV检测结果呈阳性。为进一步验证，研究人员将病羊脑组织匀浆接种至幼仓鼠肾细胞（BHK-21），经五次盲传后，从编号2201的病羊样本中成功分离出JEV毒株，命名为SH2201。

后续通过免疫荧光和Western blotting实验，在毒株中清晰检测到JEV的E蛋白和NS1蛋白，这一成果标志着SH2201成为全球首株从羊体内分离出的JEV毒株，填补了病毒宿主研究领域的重要空白。

毒株特征：高毒力本地同源株

研究团队对全球首株羊源日本脑炎病毒（JEV）毒株SH2201进行全基因组测序（GenBank: PQ488563），确认其属于JEV的GI基因型，与中国本土猪源毒株SD12的核苷酸序列同源性高达99.8%。

聚焦决定病毒毒力的关键E蛋白，序列比对显示，SH2201的E基因与SD12、HEN0701等强毒株同源性达99.3-99.5%，且在E47、E107等11个关键毒力氨基酸位点完全匹配。

为验证SH2201的致病性，研究人员采用小鼠模型开展神经侵入性与神经毒力测试。结果显示：脑内注射最低剂量（10⁰ PFU）即导致25%小鼠死亡，最高剂量（10⁵ PFU）死亡率达100%，神经毒力LD₅₀（半数致死剂量）为10⁰.⁶⁵ PFU；腹腔注射LD₅₀为10¹.³⁵ PFU，数值与已知强毒株相当，表明SH2201具备高毒力特征。

感染模型：羊病毒载量匹敌猪

为验证羊是否为日本脑炎病毒（JEV）的放大宿主，研究团队选取20只50日龄且JEV抗体阴性的湖羊，均分为静脉注射组与皮下注射组（每组5只），分别接种10⁶ PFU的羊源JEV毒株SH2201，并开展为期21天的系统观察。

实验结果显示，多数湖羊呈现发热、食欲下降等轻微症状，1只出现神经症状后实施安乐死。更关键的是，两组实验羊均出现显著病毒血症，且高水平病毒血症持续4 - 6天。

安乐死个体的脑部与扁桃体病毒载量分别达到2.0×10⁵ RNA copies/ml和3.2×10⁵ TCID₅₀/ml，脑组织病理切片呈现与人类、猪感染相似的脑炎病变特征。

该研究首次从病毒血症、排毒能力及病理表现多维度证实，羊不仅对JEV高度易感，更具备支持病毒传播的生物学条件，极有可能成为JEV传播链中的关键新宿主。

蚊媒实验：羊血高效染蚊

实验研究表明，羊源性JEV病毒血症可有效感染媒介蚊虫。研究人员采用皮下感染羊的血样对三种常见媒介蚊种：白纹伊蚊、淡色库蚊和五斑库蚊进行人工感染。14天后检测显示，蚊虫感染率分别为40.6%（13/32）、48.6%（17/35）和57.1%（20/35）。

值得注意的是，实验所用血样RNA载量与自然感染羊群（2.3×10²-2.0×10⁵ copies/mL）相当，证实羊在自然条件下可作为JEV的有效扩增宿主，通过蚊媒传播病毒。

流行调查：多地羊群自然感染

为评估羊群在自然条件下的JEV感染状况，研究团队于2023年7-8月在全国31个省份的规模化羊场开展了横断面调查，共采集3349份血清样本。

通过RT-qPCR检测发现，19个省份的样本呈现JEV核酸阳性，阳性率介于0.7%-4.6%之间。对48份阳性样本进行E基因序列分析，成功获得16条完整序列，系统进化分析显示主要流行毒株为GI基因型（占93.8%），仅新疆地区检出GIII基因型（占6.2%）。

值得注意的是，这些毒株与当地猪群和蚊媒分离株的核苷酸同源性高达99.6%-99.9%，提示存在跨物种传播链。

这些流行病学数据充分证明，JEV在我国羊群中已形成广泛的地方性流行，且病毒在不同宿主间存在频繁的传播交换。

防控警示：羊-蚊-人新循环

在传统非养猪地区（如新疆喀什），研究证实羊可作为JEV的主要扩增宿主维持病毒传播循环。该地区蚊媒及羊群中均检出JEV，提示羊-蚊传播链可能独立于传统的猪-蚊循环和涉禽传播链而存在，形成三重传播网络，显著增加人类暴露风险。