晚期前列腺癌患者AR-V7 mRNA检测的临床意义及检测方法探讨

“

引言

AR-V7是雄激素受体的一种异常剪接体，可表达一种C-端连接区域缺失，N-端区域仍保留转录活性的一种特殊蛋白。研究发现，AR-V7 mRNA的状态与新型内分泌疗法（NHT，如阿比特龙和恩杂鲁胺）的获益情况相关。

”

第一篇

背景

本研究通过对使用阿比特龙或恩杂鲁胺的患者（n=202），检测其AR-V7状态的研究，来更好的了解AR-V7在一线或二线NHT疗法的临床意义，并且探索肿瘤循环细胞（CTC-）、CTC+/AR-V7-、CTC+/AR-V7+的预后价值。

结果

1、患者入组

共202例患者（95例服用阿比特龙，107例服用恩杂鲁胺）被前瞻性的入组。CTC-、CTC+/AR-V7-、CTC+/AR-V7+的患者数量分别是53例（26.2%）、113例（56.0%）和36例（17.8%）。

以前未接受过阿比特龙和恩杂鲁胺的患者共124人，作为1线NHT人群，其中CTC-、CTC+/AR-V7-和CTC+/AR-V7+的患者分别是36例、73例和15例；以前接受过阿比特龙和恩杂鲁胺治疗的患者共78人，作为2线NHT人群，CTC-、CTC+/AR-V7-和CTC+/AR-V7+的患者分别是17例、40例和21例。

2、PSA响应

在所有的患者人群中（n=202例），对恩杂鲁胺或阿比特龙治疗有PSA响应的患者比例是：

CTC- 75.5%（40/53）、CTC+/AR-V7- 52.2%（59/113）和CTC+/AR-V7+ 13.9%（5/36）图1。经多变量逻辑回归分析发现，生物标志物状态对于PSA响应是独立预测因素。另外在1线NHT人群（n=124）和2线NHT人群（n=78）的研究中，在CTC-、CTC+/AR-V7-和CTC+/AR-V7+患者中对PSA响应的患者分布与所有患者人群的研究有相似的分布比例，并且经多变量逻辑回归分析发现，生物标志物状态对于PSA响应也被认为是独立预测因素（图2和图3）。

图1.所有的患者人群，n=202

图2. 一线NHT人群，n=124

图3.二线NHT人群，n=78

3、PSA-PFS

在所有的人群中，恩杂鲁胺和阿比特龙治疗后中位PSA无进展生存期分别是：CTC- 11.3个月，CTC+/AR-V7- 6.2个月和CTC+/AR-V7+ 2.1个月，经多变量回归分析发现，生物标志物状态对于PSA-PFS是独立的预后因素（图4.1）。在1线NHT人群和2线NHT人群中也有类似的研究发现（图4.2、图4.3）。

图4.在不同研究人群中的PSA-PFS比较

（1、2、3分别是所有人群、一线人群、二线人群）

4、PFS

在所有人群中，中位无进展生存期（PFS）分别是：CTC-患者 13.9个月，CTC+/AR-V7-患者 7.7个月，CTC+/AR-V7+ 3.1个月，在多变量回归分析中，生物标志物状态对于PFS是独立的预后因素（图5.1）。在1线NHT人群和2线NHT人群中也有类似的研究发现（图5.2、图5.3）。

图5.在不同研究人群中的PFS比较

（1、2、3分别是所有人群、一线人群、二线人群）

5、OS

在所有的人群中，中位总生存期（OS）分别是：CTC-患者 28.7个月（95%CI，28.4个月至未达到），CTC+/AR-V7-患者 29.5个月（95%CI，18.4个月至未达到），CTC+/AR-V7+ 11.2个月（95%CI 8.3-17.1个月），经多变量回归分析发现，生物标志状态是OS的独立的预后因素（图6.1）。在1线NHT人群和2线NHT人群中也有类似的研究发现（图6.2、图6.3）。

图6.在不同研究人群中的OS比较

（1、2、3分别是所有人群、一线人群、二线人群）

小结

本研究通过对1线和2线使用新型内分泌治疗的患者进行基于CTC的AR-V7 mRNA的检测，在PSA响应、PSA-PFS、PFS、OS 4个方面均发现，CTC-、CTC+/AR-V7-和CTC+/AR-V7+是独立的预后因素。

第二篇

背景

在CRPC患者中，尽管基于CTC的AR-V7 mRNA检测与阿比特龙和恩杂鲁胺的治疗获益相关，但是该检测需要对血液样本和可检测的CTCs进行精细的处理。

本研究利用ddPCR建立并验证了一种快速、绝对定量AR-V7和AR 全长（AR-FL）mRNA水平的液体分析方法，并在mCRPC患者中验证了对阿比特龙或恩杂鲁胺疗法抗性的的预测性能。

结果

1、患者入组

85例患者入组，患者中56例服用阿比特龙和29例服用恩杂鲁胺。

2、外周血中AR-V7检测

首先，研究人员通过对100万个白细胞背景下，1个VCaP细胞（人前列腺癌细胞株）的AR-V7 mRNA反复检测，评估ddPCR实验对于AR-V7和AR-FL检测分析的有效性；第二，对85例mCRPC患者和28例健康人群（作为对照组）的外周血进行AR-V7和AR-FL定量分析（图7A）。其中对照组中有18例可以检测到AR-V7表达。为了对AR-V7表达量标准化，研究人员将AR-V7转录的片段与整个AR（AR-V7+AR-FL）转录片段相比，并在随后的分析中使用该比例。在mCRPC患者的外周血中AR-V7片段的比例范围是0%-4.0%(平均是0.3%，图7B)。利用健康人员中最大的AR片段的比例（0.6%）作为cut-off值，区分“高AR-V7水平”和“低AR-V7水平”两组（图7B）。在85例患者中，有15例（18%）患者属于“高AR-V7水平”的小组。

图7.AR-V7定量检测

3、患者外周血中AR-V7状态预测PSA响应

在高AR-V7水平组中，患者对PSA均无响应（0/12）；在低AR-V7水平组中，50%（31/62）的患者对PSA有响应（图8）。因此在单变量分析中，AR-V7状态与PSA响应显著相关。经多变量逻辑回归分析发现，AR-V7状态与PSA响应显著相关，外周血中高AR-V7水平对于PSA不响应是独立的预测因素。

图8.AR-V7状态与PSA响应的关系

4、在外周血中AR-V7状态预测PSA-PFS、临床PFS和OS

高AR-V7水平与比较短的PSA-PFS（2.4个月 vs 3.7个月）、比较短的临床PFS（2.7个月 vs 5.5个月）和比较短的OS（4.0个月 vs 13.9个月）显著相关（图9）。经多变量回归分析模型分析，AR-V7状态仍与PSA-PFS（HR 7.0 95%CI 2.3-20.7）、临床PFS（HR 2.3 95%CI 1.1-4.9）和OS（HR 3.0 95%CI 1.4-6.3）显著相关。进一步研究发现，增加AR-V7表达水平对于较差的OS是独立的预测因素。

图9.外周血中AR-V7与PSA-PFS、cPFS和OS的关系

小结

检测外周血中AR-V7 mRNA水平可以简单、准确的预测接受阿比特龙或恩杂鲁胺的mCRPC患者的治疗结果。

总结

对于1线或2线使用阿比特龙或恩杂鲁胺治疗的CRPC患者，CTC+/AR-V7+的患者相对于CTC- 或CTC+/AR-V7-的患者在PSA响应、PSA-PFS、PFS、OS四个方面均显示疗效差，并且CTC-、CTC+/AR-V7-和CTC+/AR-V7可作为独立的预后因素。

对于使用阿比特龙或恩杂鲁胺治疗的CRPC患者，利用ddPCR实验区分外周血中AR-V7 mRNA的状态，其中“高AR-V7水平”患者约占15%的比例，并且外周血中AR-V7的状态与PSA响应、PSA-PFS、临床PFS和OS显著相关。

参考文献：

Antonarakis E S, Lu C, Luber B, et al. Clinical significance of androgen receptor splice variant-7 mRNA detection in circulating tumor cells of men with metastatic castration-resistant prostate cancer treated with first-and second-line abiraterone and enzalutamide[J]. Journal of clinical oncology: official journal of the American Society of Clinical Oncology, 2017, 35(19): 2149-2156.

Seitz A K, Thoene S, Bietenbeck A, et al. AR-V7 in peripheral whole blood of patients with castration-resistant prostate cancer: association with treatment-specific outcome under abiraterone and enzalutamide[J]. European urology, 2017, 72(5): 828-834