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第二代测序原理的详细解析!

第二代测序(Next-generation sequencing,NGS)又称为高通量测序(High-throughput sequencing),是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。我们都知道一代测序为合成终止测序,而二代测序开创性的引入了可逆终止末端,从而实现边合成边测序(Sequencing by Synthesis)。二代测序在DNA复制过程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记(一般为荧光分子标记)来确定DNA的序列,现有的技术平台主要包括Roche的454 FLX、Illumina的Miseq/Hiseq等。由于在二代测序中,单个DNA分子必须扩增成由相同DNA组成的基因簇,然后进行同步复制,来增强荧光信号强度从而读出DNA序列;而随着读长增长,基因簇复制的协同性降低,导致碱基测序质量下降,这严格限制了二代测序的读长(不超过500bp),因此,二代测序具有通量高、读长短的特点。二代测序适合扩增子测序(例如16S、18S、ITS的可变区),而基因组、宏基因组DNA则需要使用鸟枪法(Shotgun method)打断成小片段,测序完毕后再使用生物信息学方法进行拼接。

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web安全漫谈

不夸张的说,网络安全行业里,web安全方向的人相对来说决定占大头,而web安全工程师又是其中不可缺少,想要成为一名成功的web安全工程师,首先要知道绝对的职位要求,话不多少,网上截两段~ 1、熟悉常见Windows&linux、Web应用和数据库各种攻击手段; 2、熟悉网络安全测试方法、测试用例、漏洞判定准则; 3、有实际渗透测试经验,熟悉渗透测试各种提权方法; 4、熟悉常见脚本语言,能够进行WEB渗透测试,恶意代码检测和行为分析; 5、熟悉常见Web高危漏洞(SQL注入、XSS、CSRF、WebShell等)原理及实践,在各漏洞提交平台实际提交过高风险漏洞优先; 6、熟练使用各种安全扫描,渗透工具,有丰富的安全渗透经验并能能独立完成渗透测试; 7、掌握MySQL、MSSQL、Oracle、PostgreSQL等一种或多种主流数据库结构以及特殊性; 8、有较强的敬业精神,善于与人沟通,具有良好的团队意识,具有责任心,具有良好的抗压能力,善于处理各类突发事件,善于学习新知识。 1.负责公司相关业务的安全评估及渗透测试,并提供解决方案2.负责公司相关业务代码审计,挖掘漏洞并提供解决方案 3.跟踪并研究主流安全技术,并应用到公司相关业务中工作要求 4.熟悉常见WEB漏洞及攻击方法,比如SQL注入、XSS、CSRF等 5.熟悉常见WEB漏洞扫描工具的使用,比如WVS 6.熟悉Windows、Linux平台渗透测试和安全加固 7.熟悉Java、PHP、ASPX、Javascript、HTML5等的一种或多种WEB程序语言 8.具有Java、PHP白盒审计经验者优先 9.具有较强的团队意识,高度的责任感,文档、方案能力优秀者优先 混迹于此圈的人想必也是非常清楚的,以上纯属多余,莫见怪~ 那么我们要怎么做呢?看看大神都是怎么说的~ 01环境的搭建 熟悉基本的虚拟机配置。 Kali linux,centos,Windows实验虚拟机 自己搭建IIS和apache 部署php或者asp的网站 搭建Nginx反向代理网站 了解LAMP和LNMP的概念 02熟悉渗透相关工具 熟悉AWVS、sqlmap、Burp、nessus、chopper、nmap、Appscan、Msf等相关工具的使用。 了解该类工具的用途和使用场景,先用软件名字Google/SecWiki; 下载无后们版的这些软件进行安装; 学习并进行使用,具体教材可以在SecWiki上搜索,例如:Brup的教程、sqlmap; 待常用的这几个软件都学会了可以安装音速启动做一个渗透工具箱; 了解msf的基础知识,对于经典的08_067和12_020进行复现 03Web安全相关概念 熟悉基本概念(SQL注入、上传、XSS、CSRF、一句话木马等)。 通过关键字(SQL注入、上传、XSS、CSRF、一句话木马等)进行Google/SecWiki; 阅读《精通脚本黑客》,虽然很旧也有错误,但是入门还是可以的; 看一些渗透笔记/视频,了解渗透实战的整个过程,可以Google(渗透笔记、渗透过程、入侵过程等); 04渗透实战操作 掌握渗透的整个阶段并能够独立渗透小型站点。 网上找渗透视频看并思考其中的思路和原理,关键字(渗透、SQL注入视频、文件上传入侵、数据库备份、dedecms漏洞利用等等); 自己找站点/搭建测试环境进行测试,记住请隐藏好你自己; 思考渗透主要分为几个阶段,每个阶段需要做那些工作,例如这个:PTES渗透测试执行标准; 研究SQL注入的种类、注入原理、手动注入技巧; 研究文件上传的原理,如何进行截断、双重后缀欺骗(IIS、PHP)、解析漏洞利用(IIS、Nignix、Apache)等,参照:上传攻击框架; 研究XSS形成的原理和种类,具体学习方法可以Google/SecWiki,可以参考:XSS; 研究Windows/Linux提权的方法和具体使用,可以参考:提权; 可以参考: 开源渗透测试脆弱系统; 05关注安全圈动态 关注安全圈的最新漏洞、安全事件与技术文章。 通过SecWiki浏览每日的安全技术文章/事件; 通过Weibo/twitter关注安全圈的从业人员(遇到大牛的关注或者好友果断关注),天天抽时间刷一下; 通过feedly/鲜果订阅国内外安全技术博客(不要仅限于国内,平时多注意积累),没有订阅源的可以看一下SecWiki的聚合栏目; 养成习惯,每天主动提交安全技术文章链接到SecWiki进行积淀; 多关注下最新漏洞列表,推荐几个:exploit-db、CVE中文库、Wooyun等,遇到公开的漏洞都去实践下。 关注国内国际上的安全会议的议题或者录像,推荐SecWiki-Conference。 06熟悉Windows/Kali Linux 学习Windows/Kali Linux基本命令、常用工具。 熟悉Windows下的常用的cmd命令,例如:ipconfig,ns

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从几天到几十秒,从繁杂操作到一条指令,AI 帮你征服 PPT

“明天开会需要一个PPT,你今天晚上回去准备一下。” 大部分打工人尤其是职场小白接到这样的通知,内心都会瑟瑟发抖。 因为这不仅意味着加班,还要经历一个痛苦且复杂的执行过程:搜集整理相关背景资料、确定主题风格、找适合的模板,一顿操作下来大概一两个小时的时间就过去了。然后进入制作过程:这段文字应该居中还是对齐?字体多大才显得不突兀?这张图放哪里合适?这里应该怎么布局?一番操作下来两三个小时又过去了。 第二天,拿到会上作报告时,得到的反馈大多是“没有突出主题,没有达到预期效果...”在职场中,这样的情况似乎已经成了家常便饭,PPT制作也成了打工族最头疼的事情。

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Nature Methods | 中山骆观正实验室在RNA修饰方法学领域取得重要进展

RNA分子在生命出现伊始就存在,在漫长的演化历程中,逐渐从生命信息存储和表达的双重身份中特化出来,成为信息传递的媒介。处于中心法则中间的RNA,既不像DNA存储遗传信息,也不像蛋白质直接体现生命活动,只在少数特例(如病毒、核酶)中提醒人们它仍然保留来自远古的使命。近年来,表观转录组学(epitranscriptomics)的提出为该领域注入了新的思想【1,2】。人们发现,真核生物不同种类RNA上存在超过150种化学修饰,其中很大部分继承于古老的共同祖先。这些修饰或参与了RNA与其它大分子的互作,或影响了RNA本身的代谢,在生命过程中起着至关重要的作用【3,4】。

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