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    Hemberg-lab单细胞转录组数据分析(四)

    文库拆分因使用的前期Protocol不同或构建的流程不同需要有对应的处理方式。我们认为最灵活可用的文库拆分工具是zUMIs (https://github.com/sdparekh/zUMIs/wiki/Usage),可以用来拆分和比对大部分基于UMI的建库方式。对于Smartseq2或其他双端全长转录本方案,数据通常已经拆分好了。例如GEO或ArrayExpress之类的公共数据存储库会要求小规模或plate-based scRNASeq数据拆分好再上传,并且很多测序服务商提供的数据都是自动拆分好的。如果使用的分析流程依赖于拆分好的数据但测序服务商提供的数据没有拆分时就需要自己拆分。因为不同的建库方案引入的barcode序列的长度和位置不同,通常都需要自己写脚本解决。

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    scRNA-seq数据处理—demultiplexing

    根据使用的protocol和完整pipeline中的的特定pipeline,demultiplexing的方式不同。我们所知道的最灵活的demultiplexing pipeline是zUMI,它可用于demultiplexing和大多数基于UMI的protocol的比对。对于Smartseq2或其他pair-end全转录的protocol,数据通常已经被分解。诸如GEO或ArrayExpress之类的公共存储库需要在上传之前对基于小规模/基于plate的scRNASeq数据进行分解,并且许多测序设备将在将数据返回给您之前自动demultiplexing。如果您没有使用已发布的pipeline,并且数据未被测序工具demultiplexing,则您必须自己做。这通常需要编写自定义脚本,因为barcode可能具有不同的长度和在read中有不同位置,具体取决于所使用的protocol。

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