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    Illumina上机前处理及测序全网最全教程!

    3.装了上机前变性需要的NaOH,Phix,和EBT。 其中1和2是必备试剂盒,3号不是测试必备试剂盒,而是最开始安装时调试用的。...上机前的文库前处理及变性 这一大块最是麻烦的,也是上机前花时间最长的步骤。...(如果上机浓度大于10pM小于20pM,起始变性的文库的浓度是4nM。如果上机浓度小于10pM ,起始变性的文库可以是2nM) 稀释的时候用超纯水稀释。稀释后再用Qubit定量。...-哪个文库需要的数据量越多,比例要越高; -Illumina上机片段长度一般为中值是450bp,一般范围是200-700,大于700bp的长度就要相应减小上机浓度,以保证更好地数据产出。...注意: NaOH稀释好及最后上机前,最好测一下pH。两次pH值大约为~13和~8。如果上机前这一次pH偏高,需要重新稀释及混合试剂。 HT1会剩下来很多,尽量不要留着下次接着用,可能会引入污染。

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