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全长转录组 | Iso-Seq 三代测序数据分析流程 (PacBio) (3)-- SQANTI3 v5.2

Functional IsoTranscriptomics (FIT) 是美国弗罗里达大学(University of Florida)Ana Conesa 教授团队(Genomics of Gene Expression Lab, ConesaLab)开发的在转录本isoform水平上进行生物信息学分析的流程,旨在提供一个全长转录组end-to-end的解决方案 (图1)。SQANTI 3 构成了FIT流程的第一个模块,其设计目的是使长读序列定义的转录组的质量控制和过滤成为可能,这些转录本通常含有artifacts和假阳性。因此,对全长转录组进行校正是进行FIT分析的前提,且对产生可靠的、在生物学上合理的结论/假设至关重要。SQANTI 3 是SQANTI 工具(发布)的最新版本,该版本合并 SQANT 1 和 SQANTI 2 中的功能并加入了新的功能 ,更好的对全长转录本进行深度表征 。

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重复一篇3分左右纯生信文章(第二部分)

使用单变量Cox模型计算每个lncRNA的表达水平与患者的总体存活(OS)之间的关联。当其P值小于0.05时,lncRNA在单变量Cox分析中被认为是统计学上显著的。接下来,采用多变量Cox分析来评估lncRNA是否为OS的独立预后因素。进行后向逐步筛选方法以进一步选择最佳模。然后,通过Lasso回归筛选确认所选择的lncRNA。基于表达水平乘法回归模型(β)与线性组合建立基于lncRNA的预后风险评分。预后指数PI=(β* C9orf139的表达水平)+(M * 600HG的β表达水平)+(RP5- 965G21.4的β表达水平)+(RP * -436K8.1的β*表达水平)+(β *表达水平CTC-327F10.4)。基于PI中位数,PDAC患者被分为高风险组和低风险组。并且绘制低风险组或高风险组病例的Kaplan-Meier生存曲线。为了进一步验证基于5-lncRNA的预后指数是否独立于其他临床变量,分别使用单变量和多变量Cox回归分析进行分析。通过比较基于预后指数的生存预测的敏感性和特异性,使用5年ROC曲线评估其预后性能。

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【直播】我的基因组80:为什么有些基因的内部测序深度差异如此大

这一讲里,我们依旧根据统计的基因测序的深度进行一下讨论,来看看为什么有些基因的内部测序深度差异如此大? 在前面我们的计算中,s列表示的是基因的每一个坐标的测序深度的方差,所以代表着基因的内部测序深度差异值。 在正常WGS中,每个基因的各个部分测序深度应该趋近于一致,可以形成一条直线。但是如果基因太长,内部GC含量不一致,那么每个基因的各部分测序深度可能就不一样了,而且有些基因可能是部分序列重复,这样的话这个部分序列就会被超量测序。不过,基因内部的部分缺失不会反应在S值里面,因为没有计算那些未被覆盖的基

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领券