低聚糖的制备

低聚糖可通过人工合成、多糖降解以及从植物中提取等方法来制备。许多植物的根、茎、叶中都或多或少含有低聚糖，可通过分离纯化技术来提取。

1.初步纯化

低聚糖粗提物中通常含有色素、蛋白质和氨基酸等杂质。脱色主要采用用活性炭吸附法、过氧化氢法和树脂吸附法[1]。在不同的脱色方法中，过氧化氢法脱色效果最好，但要严格控制过氧化氢的用量，否则会破坏多糖结构，甚至导致多糖退化；活性炭吸附法对多糖结构影响不大，但由于其多孔结构，多糖保留率相对氧化法和树脂吸附法保留较低；大孔树脂吸附具有较高的稳定性和选择性，是一种理想的多糖脱色方法。

低聚糖中的蛋白质主要用 Sevag 法和三氯乙酸法两种方法祛除，其中，三氯乙酸去除蛋白质效果最好，糖类物质保留率较高，但过量三氯乙酸会导致糖类物质降解。Sevag 试剂反应温和，但脱蛋白效率低，糖保留率低，有毒试剂残留。

2.柱层析法

在分离纯化低聚糖的过程中，柱层析分离法是目前比较常用的分离方法之一，比较常见的色谱柱填料有葡聚糖凝胶层析和离子交换柱。离子交换柱层析是根据固定相与样品之间离子结合力不同、流出速度不同来将多糖混合物分离。凝胶柱层析是基于层析柱的分子筛效应，根据各分子大小组分在凝胶柱的流速不同，从而达到分离效果，其他的还有石英砂、活性炭、硅胶、铝矾土、沸石和硅藻土等。

3.膜分离法

膜分离法是根据滤膜孔径的大小在一定压力下将混合物分开，膜分离法无污染、能耗低且分离效率高，超滤、纳滤和反渗透等常用于低聚糖的膜分离[2]。

4.分步沉淀法

一般情况下，糖类物质分子量越高，越容易被醇类、酮类物质沉淀，因此可以通过调节醇类、酮类物质浓度达到分离不同糖类分子量的目的[3]。

参考文献：

[1] 张小辉. 铁皮石斛多糖的纯化工艺及免疫活性研究 [D]. 广东工业大学, 2021.

[2] 刘以晴, 马月云, 刘宗浩, 等. 褐藻胶寡糖的制备、分离及表征研究进展[J]. 食品工业科技,2022, 43(09): 456-468.

[3] 王帅, 高世勇, 李婉秋. 黄芪多糖的提取、分离纯化及药理活性研究进展[J]. 特产研究,1-8.