蛋白质测序降解为什么要从n端开始
蛋白质测序中的降解通常从N端(氨基端)开始主要是由于:
1、酶特异性:
用于蛋白质测序的酶,如Edman降解中的苯异硫氰酸(PITC),特异性地与蛋白质的N端氨基酸反应。这种特异性确保了测序过程的准确性和可重复性。
2、测序简便性:
从N端开始可以逐步去除每个氨基酸并进行鉴定。这种方法较为直接和高效,因为蛋白质的氨基酸序列是从N端到C端合成的。
3、生物学意义:
在某些情况下,蛋白质的N端可能具有特别的生物学意义,如信号肽的存在,这些都是研究者感兴趣的。
图1. 蛋白质N端和C端测序流程
然而,也有从C端开始的蛋白质测序方法,如羧肽酶C(carboxypeptidase C)的使用,但这些方法通常不如从N端开始的方法常见或高效。随着质谱技术的发展,蛋白质质谱分析提供了一种替代的、高度灵活的蛋白质测序方法,可以鉴定蛋白质的全部或部分氨基酸序列,无论是从N端还是C端。
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