糟糕！白蛋白校准屡试屡败

作者：陈海丽

单位：上海市公共卫生临床中心检验科

在临床生化工作中，项目失控是我们经常会遇到的问题。一般情况下，大多数失控项目重新校准后即可恢复正常，而本次分享的案例中，白蛋白（ALBG）和总蛋白（TP）两个项目首先质控偏低报警，后续ALBG经屡次校准失败后终于成功，但是复测质控两个项目却飘高失控。

蛋白项目质控忽高忽低，校准也无法解决失控问题，这究竟是为什么呢？

案例经过

某工作日，早上按照往常工作流程进行生化仪器日常保养和质控。随后发现ALBG质控1水平和2水平偏低，报警2-2S，TP 1水平偏低2S。

我们生化室使用某品牌全自动生化分析系统，ALBG（溴甲酚绿法）和TP（双缩脲法）均使用原装常温试剂，近期并未更换批号，稳定期及有效期均符合使用要求。

取生化多项校准品（MCC）校准，TP校准一次通过，而ALBG校准过程异常曲折：第一次校准失败，报警校准因子超出范围；后续多次尝试后终于校准成功；再次检测质控，ALBG和TP质控1和2水平却偏高，超出2S，而3水平正常。

ALBG校准失败

查看校准报告分析数据：

白蛋白和总蛋白校准报告数据分析

·

ALBG使用校准品为MCC 2，对应Cal 2，Cal 1浓度为仪器自动从Cal 2稀释所得，该项目设置预期校准因子为58，预期校准因子变异不超过20%，所以校准因子处于46.6-69.6区间符合要求，超过此区间即会报警校准因子超出范围。失控后，Cal 1校准吸光度比失控前偏低 ( 0.2634 VS 0.3387 )，导致校准因子偏高超出69.6（71.0896 VS 54.2515），所以判定校准不通过。最后虽然侥幸校准成功，但最终Cal 1校准因子为67.5505（预期为58，失控前为54.2515），所以质控结果1、2水平偏高失控。

TP则使用MCC 1和MCC 2两水平校准品，分别对应Cal 1和Cal 2，虽然此项目校准一次通过，但Cal 1校准吸光度比历史偏低 ( 0.1495 VS 0.1598 )，导致Cal 1校准因子偏高（287.6254 VS 262.8286，预期为270），所以复测质控偏高失控。

从上述校准报告我们初步发现端倪，为什么蛋白项目发生反应后，校准吸光度均较历史偏低，尤其是Cal 1？是什么问题导致反应不充分？

此次失控原因排查需要时间，为了不耽误患者样本检测，我们暂停该仪器使用，启用其它仪器检测样本。然后围绕“人、机、料、法、环”，仔细检查各种记录，希望能从蛛丝马迹中查出异常。

本实验室使用3个水平生化多项质控，除了蛋白项目，其余项目均在控，排除质控品原因；两个蛋白项目均未更改试剂批号，旧瓶试剂效期符合使用要求，更换新瓶试剂质控仍然失控，排除试剂原因；校准品校准其它项目并无异常，排除校准品原因。

经过逐一排查，实在无法解决该问题，紧急联系工程师到现场。经过仔细排查检修，发现该仪器R1试剂盘内圈搅拌棒异常，下面绿色搅拌部分已断，随即更换搅拌棒，重新校准蛋白项目，校准因子均正常（见上表）。TP Cal 1校准因子为269.9309，ALBG Cal 1校准因子为54.3384，质控均正常通过。

异常搅拌棒

正常搅拌棒

·

案例分析

为什么R1试剂盘内圈搅拌棒异常，仅有ALBG和TP项目质控失控呢？

本室使用的分析仪有试剂盘1和2，分别对应装载试剂R1和R2，每个试剂盘有内圈和外圈，内外圈分别有对应的试剂吸样针和搅拌棒。此次R1试剂盘内圈搅拌棒故障，加好样本和内圈R1试剂后无法充分混匀，使得对应检测结果偏低。推测所有内圈项目均会受到一定的影响，但对单试剂项目影响尤其严重。

该仪器R1试剂盘内圈单试剂项目仅有TP和ALBG，为1点终点法，单试剂项目抗干扰能力差，由于对应搅拌棒故障导致反应不充分，最终质控偏低失控。校准过程同样也会受到影响，尤其是ALBG Cal 1是由Cal 2稀释获得，Cal 1未能充分混匀，校准吸光度偏低，校准因子偏高，复测质控反而会偏高失控。

而内圈其余几个项目均是双试剂，大多数项目R1试剂主要起稳定、提高抗干扰反应能力等作用，R1加入后虽然没有和样本充分混匀，但加入R2后搅拌充分，运行正常，检测结果受影响相比会小一些，再者实验室发现处理还算及时，所以未造成严重后果。

总结

本次R1试剂盘内圈搅拌棒异常导致蛋白项目失控的案例给我们敲响了警钟，在日常检验工作中，除了常规质量控制，如期进行设备维护保养不可忽视。日常工作中遇到失控时，需根据失控的情况进行初步的判断，从人、机、料、法、环几个方面寻找失控原因并纠正。常规方法无法解决时，需排查设备硬件问题，及时联系工程师指导或到场解决问题，保证提供给临床准确、可靠的数据。

编辑：yeah  审校：小冉