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SPR全称表面等离子共振技术,是一种基于物理光学原理的生物物理学技术,用于检测分子间相互作用。它利用光与等离子波的共振效应,通过监测SP2角的变化,实时分析生物传感芯片上配体与分析物之间的相互作用情况。相较于传统的分子互作检测技术,SPR技术具有实时检测、无需标记样品、样品需求量低等优点。SPR可以提供多种分子间相互作用信息,如靶标是否结合、结合强弱以及结合解离的速率快慢等信息。其中解离平衡常数KD反应结合强弱,而结核解离速率常数可以反应结合解离的快慢。此外,SPR技术还能进行分子垂钓,实现对未知互作因子的发现与鉴定。SPR技术发表文献多,技术成熟。
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并且SPR检测技术被中国药典2020年版正式收录,被誉为分子互作领域的金标准。在进行SPR检测的时候,需要先通过氨基偶联、标签补获等方式将配体固定到芯片上。再通过多个浓度的样品进样和芯片再生的循环,可以得到分子间的亲和力和动力学等相互作用信息。目前SPR广泛应用于许多领域,如在生命科学领域中检测蛋白与蛋白、蛋白与小分子等分子间的相互作用。在医药领域,SP2可以用于药物筛选、鉴定和临床诊断等。同时,SP2在食品安全检测、农业生产检测以及环境监测等领域也有广泛的应用。SPR最常见的应用是检测两个分子间的相互作用。通过5~6个浓度的SPR检测,可以得到两个分子间的亲和力、KD值以及动力学分析结果。从而直观反映分子间亲和力的强弱以及结和解离的速率。SPR也适合作为虚拟筛选后的验证方法。例如在此文献中,作者先通过虚拟筛选得到62个靶向soat蛋白的潜在化合物。
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并验证了筛选化合物nalo tnib与靶蛋白的催化位点结合,接着通过SSPR对SOATT1蛋白进行药物筛选,并通过阳性抗体验证SPR系统的可靠性。SPR单浓度筛选验证了33个虚拟筛选结果,获得10种化合物多浓度SPR检测,进一步检测筛选配体与SOAT1的亲和力KD值,最后进行细胞活性验证及机制分析。此外,SPR可以用于从中药提取液中垂钓兄子化合物。通过将诱饵分子固定在芯片表面,当代检测样品流经芯片时,未知的互作因子能够与固定的诱饵分子结合,从而被捕获。随后,这些互作因子可被自动化回收,并结合质谱技术提取和鉴定其分子结构。Mce拥有专业的分子互作研究平台。
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