cck8怎么分析数据？CCK8实验及数据分析的全流程原创

细胞活力指的是细胞的存活能力或功能状态。细胞活力的高低反映细胞的健康状况。它会受到内环境稳态、PH、外加刺激营养物质等多重因素的影响。对细胞进行活力检测的目的包括了解细胞状态，检测外加物对于细胞的活性影响。归因化数据等。常见的细胞活力检测方法有MTTCCK8、CTG等，这三种方法各有优缺点，CCK8凭借其重复性好、灵敏度高成为各实验室的首选。CCK8属于一步伐检测，使用便捷。接下来，小M将以CCK8法为例，为大家详细介绍其实验设计与数据分析。实验需要设置实验组、对照组、空白组，并在96孔板盖子上做好标识，以防实验分组出现混淆。对于培养好的细胞。

经过清洗、消化、收集及稀释细胞到2万个每毫升后，按照每孔2000个细胞、3个检测时间点、4个平行的设置，计算所需总细胞数。根据实验准备好接种细胞并转移至培养箱进行培养，带细胞状态良好时，按照预设浓度加入待测药物。并根据以往经验或预实验结果确定培养时间，一般为24小时、48小时、72小时。培养到设定时间，每孔加入10μLCCK8溶液，去除气泡后采用十字法或震荡方式混匀。痣细胞培养箱孵育1~4小时，随后使用酶标仪在450nm波长下检测吸光值。注意确保不同处理时间的CCK8复育时间保持一致。根据相应计算公式对原始数据进行预处理。若为细胞增殖实验，使用A1组减去AB组数据的差值除以AC组减去AB组数据的差值。

得到细胞增殖数据，细胞毒性则按照相应方法处理。原始数据从仪器导出于Excel中，再根据实验记录整理数据。对照组、实验组的数据均需扣除空白对照，并计算对照组的平均值，依据细胞增殖计算公式可得出增值率。扣除空白组的数据进行转置，便于软件作图使用细胞毒性实验的数据与处理方法相同。打开Prism，新建data table, 可以根据作图目的选择X y column group.我们以XY为例，计算EC50值，并进行曲线拟合复制处理好的数据粘贴到新建的表格中，Results中新建分析表，选择transform concentration X对浓度进行log转化，得到新的数据。Results中新建分析表，以转化后的数据为基本数据，采用non linear regression计算得到EC50值，Graphs中得到拟合曲线，双击坐标轴，调整位置、字体线条等。毒性分析也是类似的，小主们练习一下吧。

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