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转录组测序分析专题——比对定量

一、参考基因组准备基因组文件:fasta 注释文件:gff/gtf1.常用的参考基因组数据库Ensembl:www.ensembl.orgNCBI:https://www.ncbi.nlm.nih.gov...file.bam |less -S #查看头部区samtools view -h file.bam |less -S #查看全部2.subjunc比对——除了RNA-seq比对还能做外显子junction分析...-o SRR1039510.Hisat_aln.sorted.bam SRR1039510.Hisat_aln.sam##----depth统计测序深度# 得到的结果中,一共有3列以指标分隔符分隔的数据...bed.depth# 如何找到多比对的reads,flag值的理解# (0x100) 代表着多比对情况,所以直接用samtools view -f 0x100可以提取 multiple比对的 情况五、表达定量...salmon-index.log &cd $HOME/project/Human-16-Asthma-Trans/Expression/Salmon##----运行# 编写脚本,使用salmon批量对目录下所有fastq文件进行定量

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quanTIseq:肿瘤浸润免疫细胞定量分析

quanTIseq基于反卷积算法,利用bulk samples的RNA_seq数据,可以对肿瘤样本中不同种类免疫细胞的组成进行预测,支持以下10种类型的免疫细胞 B cells Classically...T cells CD8+ T cells Regulatory CD4+ T(Treg) cells Dendritic cells 该软件设计成pipeline的形式,直接输入样本对应的测序原始数据...,进行预处理,定量,免疫细胞组分预测,数据分析流程示意如下 ?...分成以下3个模块 预处理,使用Trimmomatic处理原始测序数据,去除adapter和低质量碱基 基因表达定量,使用kallisto软件进行定量定量的方式为TPM 细胞组分预测,该软件的核心,利用反卷积算法预测样本中不同细胞的比例...通过该软件可以方便的分析肿瘤样本的免疫细胞浸润情况,进一步结合生存分析可以从肿瘤免疫微环境中筛选相关的biomarker。

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统计分析篇-定量资料统计分析(1)

1.请阅读我在临床试验中,常常分不清楚所要分析数据是什么资料类型,以及不明确用什么统计分析方法去分析自己手头上的数据。鉴于以往的数据分析经验,写成如下内容供参考。...由此可分成以下几种资料类型:组别终点指标正态性方差齐统计检验目的统计方法优先选择单组定量正态/比较均值与历史对照是否有统计学差异t检验单组定量偏态/比较均值与历史对照是否有统计学差异数据转换后t检验,或...Wilcoxon检验两组定量正态方差齐比较两组差异t检验两组定量正态方差不齐比较两组差异校正t检验两组定量偏态方差不齐比较两组差异Wilcoxon检验、正态近似法多组定量正态方差齐比较多组均值是否完全相同方差分析多组定量正态方差齐比较多组均值两两之间是否相同...LSD-t检验、Bonferroni法多组定量正态方差不齐比较多组均值是否完全相同Kruskal-Wallis检验多组定量正态方差不齐比较多组均值两两之间是否相同Nemenyi法多组定量偏态方差齐比较多组均值是否完全相同...Nemenyi法此处仅列出定量指标的常用分析方法,定性指标的分析方法请找将来的文章。

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如何区分数据是定性数据还是定量数据

定量数据可以用来问“多少”的问题,生成结论性的信息。 可以通过以下方式生成定量数据: 测试 产品数据指标上报 实验 调查等 产品团队更加依赖定量数据,因为它更加可靠,更加接近客观事实。...定量数据的优点:具体的、易于沟通的、高可靠性的。 04 那种类型的数据更适合数据分析? 定性数据几乎被视为非结构化数据或半结构数据,这种数据类型格式松散,结构很少。...因此无法使用传统的方法收集和分析定性数据。 理解定性数据可能既费时又费钱,但是也有一些方法可以构建这些数据。NoSQL(非关系型数据库)的兴起使定性数据的搜集和存储变得更加易于管理。...现在许多数据的BI系统和可视化平台为我们提供了存储、收集和分析定性数据的方法。 定量数据几乎被视为结构化数据,这种类型的数据以某种格式化,可以存储在关系数据库中快速组织和搜索。...结构化数据最常见的例子如电子表格中的数字和值。 定量数据和定性数据是相辅相成的,因此通常首选定量数据进行数据分析。将软数据和硬数据结合,软硬结合可以使我们做出正确的假设并获得正确的见解。

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RNAseq定量方法

一、比对参考基因组还是参考基因集 为了获取表达矩阵,可以将测序数据比对到参考基因组然后通过坐标文件 GTF(GFF 或者 BED)统计每个基因比对上的数据计算丰度,或者直接与参考基因集进行比对...目前开发出一些工具可以用户转录本水平的定量,例如 RSEM 工具。 三、几种 RNAseq 定量方法比较 给定两个基因,如何比较是否存在表达差异呢?如何进行量化。...无论采用哪种比较方法,我们都应该知道下面两个原则: 1、RNAseq 定量都是一种相对定量的方法,不同的定量方法,结果会有所差异; 2、一般研究只关注差异最大的一些基因,因此...,无论采用哪种定量方法,差别最显著的都会凸显出来。...nf 是比对至目标基因的 fregment 数量 对于单末端测序数据,由于 Cufflinks 软件计算的时候是将一个 read 当做一个fragment 来算的,故而 FPKM 等同于

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【信管10.3】风险定量分析及应对监控

风险定量分析及应对监控 通过前三个过程,我们已经有了风险登记册,也就是一个所有识别出来的风险情况。然后可以通过定性风险分析来进行分类和排序。...接下来我们要继续通过定量,也就是数据的手段来继续完善风险登记册。只有有了详尽的风险登记册,我们才能在后续继续进行风险的应对以及控制。这些就是我们今天要学习的内容。...实施风险定量分析 定量风险分析过程是对这些风险事件的影响进行分析,并就风险分配一个数值。它对项目结果以及实现项目结果的概率进行量化,是一种进行项目决策的 量化 方法。...这些都是实施定量分析工具的主要内容。 实施定量分析的结果输出也是去更新风险登记册以及概率与影响矩阵。它的工具与技术主要包括数据收集技术和表示技术以及定量风险分析和建模技术。...其中,数据收集技术又包括:访谈、概率分布、专家判断。而定量风险分析和建模技术中又包括:敏感性分析、预期货币价值分析、决策树分析以及模型和模拟。我们重点要学习的是定量风险分析和建模技术中的这些工具。

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【操作篇】荧光共定位的定量分析

因此,我们需要对这种共定位关系进行定量分析。 今天的文章主要从操作上做出说明,之后将会从测量原理、分析、后期组图上系统地说明。 ---- 图文步骤 1....(数据是基于以上散点图进行回归分析,得到的皮尔逊相关系数为0.919032,重叠系数R为0.932092,接近1,说明红绿通道散点相关性极强!) ?...7.总结一下,操作后我们得到红绿通道散点图、皮尔逊相关系数以及重叠系数,这三个要素是报告荧光共定位分析的最重要的数据,必须在论文中报告。...下期预告:测量原理和分析 往期推荐阅读: 各种细胞器典型标记物。 什么是荧光原位杂交(FISH)? 如何降低荧光实验的自发荧光?

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工业视觉中如何定量分析镜头光学性能

工业视觉中如何定量分析镜头光学性能 1、MTF的理解 如果不知道MTF可以点击看下 MTF (调制传递函数) 光学传递函数(OTF)包括调制传递函数(MTF)和相位传递函数(PTF)两部分,其中MTF代表物像频谱对比度之比...MTF解释了镜头的分辨率和对比度之间复杂的关系,它直接、定量、客观地表述了光学系统的成像质量,是目前公认的分析镜头解像能力比较科学的方法。...MTF测量法作为评定光学系统成像质量的一种方法,不像目视星点检测和分辨率测量法,测量结果很大程度上取决于观察者的分辨差异,MTF测量法能给出定量的判断;而且,在相同的测试条件下,镜头的MTF可以与设计的...以点光源为例,点源目标经过被测透镜后形成艾里斑,由于点光源成像后的图像非常小,如果采用CCD直接采集点光源的成像,不利于图像的分析处理,会降低系统的测试精度。...图像处理系统读取图像沿艾里斑直径方向上像素点的灰度值,可以将每行像素点的灰度值数据作为所测得的光通量,用得到的光强分布结果求解光学传递函数。

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cellranger定量结果详解

引言 本文将联系原推文 单细胞实战(五) 理解cellranger count的结果 对我们上一部分获得的cellranger定量结果文件进行解读 Cellranger结果 我的结果: web_summary.html...文档 打开时就能对数据进行一个判断,网页顶端颜色显示为黄色或者红色说明数据存在异常 看看我的,数据质量有点差,怎么回事 糟糕,从小鼠的5个样品的10x技术单细胞转录组上游定量(文末赠送全套代码)项目copy...脚本的时候参考基因组忘记从小鼠改为人了: 修改脚本重新定量 使用正确的参考基因组后: 定量结果解读 参考资料: cell ranger结果详细解读 https://zhuanlan.zhihu.com.../p/390516422 Cellranger count 中网页结果说明 https://www.jianshu.com/p/5d8b87f4bd0e 一步一步着手做生信分析 https://zhuanlan.zhihu.com...;其实反映的是测序数据的利用率。

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【探索】肝细胞肥大图像之定量分析(一)

肝细胞肥大的分析难点? 正所谓,心中了了,眼下难明。诊断是容易的,困难的是如何界定肥大的程度。实操时,常常难以界定肝细胞肥大的程度,最多只能通过分级法解决。...肝细胞肥大有可能定量分析吗? 如果想要在切片上定量分析肝细胞肥大,肝细胞平均大小这一重要指标必须得到。常规的思路是通过画出肝细胞膜边界,直接测量得到数据。但是人工操纵几乎不可能实现,只能依靠计算机。...作者采用脏体比和肝细胞大小进行线性回归分析的思路与我预想的分析模式不谋而合。这个分析点是很重要的。 ?...遗憾的是,作者分析肝脏细胞大小这一最关键指标时,采用了德国的一款软件“Definiens Developer XDTM” 。显然咱们没法搞到这玩意,只能另想替代方法。 ?...正因为肝细胞边界分割难度极大,我的分析策略一开始就排除了直接测量法,而计划选择间接测算。限于篇幅,关于我的分析模式,将写在下一期。这种模式既能够应用于科研,也更适合医学图像AI分析的开发者借鉴。

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使用EzReson进行化学共振分析(1):定量的共振理论

其原因大概因为定量的共振分析一般需要通过价键(Valence Bond,VB)理论[2]计算来实现,以获得各共振结构的贡献比例、相对能量以及共振能等信息,而价键理论的计算比当前普遍使用的密度泛函理论(DFT...因此,一个比较好的解决思路是:首先进行快速高效的DFT计算,然后在DFT波函数的基础上进行定量的共振分析。根据这一思想,人们提出了两种不同的定量共振分析的理论,下面就先简要介绍一下。 1....基于密度矩阵的共振理论(DMRT)与自然共振理论(NRT) 顺便介绍一下另一套定量共振分析理论——自然共振理论(Natural Resonance Theory,NRT),它是在量子化学圈中长期流行的共振分析理论...WFRT共振分析的一些高级应用可用来解决诸如预测苯的取代基效应、衡量氢键强度、分析Diels–Alder反应中电子流向等较复杂的化学问题(详见文献[4])。 本篇主要介绍了定量的共振理论。...后面我将通过一些具体实例来介绍一下如何使用EzReson程序进行定量的共振分析。 参考文献: [1] D. G. Truhlar, J. Chem.

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基于Salmon的转录组批量定量流程和差异分析

继续前文:基于Salmon的转录组定量流程 循环定量多个样品的表达量 整理样本信息表,命名为sampleFile,内容如下: Samp conditions individual untrt_N61311...DESeq2差异基因鉴定 找到Salmon的输出文件并压缩起来,用于下载到本地进行差异分析。...quant.sf 获得基因和转录本的对应关系,获取基因的表达量 # 如果没有GTF文件,可以用其他文件,只需获取转录本和基因名字对应关系就可以 # 如果不知道对应关系,也可以把每个转录本当做一个基因进行分析...然后下载sampleFile、GRCh38.tx2gene、salmon.output、quant.sf.zip文件到本地进行下游分析。...具体差异基因鉴定可参考高通量数据中批次效应的鉴定和处理 - 系列总结和更新。

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