在Linux中,我们可以从命令行或桌面文件管理器创建一个新文件。 对于定期使用Linux的任何人来说,知道如何创建新文件都是一项重要技能。 在本教程中,我们将向您展示使用命令行在Linux中快速创建新文件的各种方法。 在你开始之前 要创建一个新文件,您需要对父目录具有写权限。否则,您将收到一个权限被拒绝的错误。 当您要从Shell脚本创建包含多行文本的文件时,通常使用此方法。 例如,要创建一个新文件,file1.txt您将使用以下代码: << EOF > file1.txtSome lineSome other lineEOF Copy Heredoc的正文可以包含变量,特殊字符和命令 以下命令将创建一个名为1G.test1GB 的新文件: fallocate -l 1G 1G.test Copy 结论 在本教程中,您学习了如何使用各种命令和重定向从命令行在Linux中创建新文件。
1、通过如下的网站进入 NCBI ,可以看到它包含许多的子库,其中 Gene 就是我们一般下载基因序列的库,接下来,在后面的输入框输入 oct4 并点击 Search。 2、可以看到该基因在不同物种和实验中所测得的相同基因序列,我们选择其中智人的POU5F1基因。 值得注意的是 POU5F1 是 Oct4 基因的别名,本质上指的一个基因 ? 3、向下滚动,直到看到如下图所示的 FASTA 链接,点击进入。 ? 4、在这个页面就可以看到通过测序技术所得到的DNA序列。 ? 5、通过如下步骤我们可以得到该基因序列的 fasta 格式文件 ? 1、进入main.py文件,我们先把序列文件读取出来看看,到底是怎样的结果 with open('res/sequence1.fasta') as file: for line in file: print (line) 2、可以看到Fasta格式开始于一个标识符>,然后是一行描述,下面是序列,直到下一个>,表示下一条序列 这些字符串看起来和下载 Fasta 文件页面显示的差不多
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目前也已有很多工具用来切除接头序列和低质量碱基,比如SOAPnuke、cutadapt、untrimmed等不下十个,但这其中比较方便好用的是Trimmomatic(也是一个java程序)、sickle 不是挖掉read中的这部分低质量序列,而是像切菜一样,直接从低质量区域开始把这条read后面的所有其它碱基全!部!剁!掉!否则就是在人为改变实际的基因组序列情况。 8.3为trimmatic的adaptor文件夹创建软连接 ln -s ~/src/Trimmomatic-0.39/adapters/TruSeq3-PE.fa ln -s ~/src/Trimmomatic search type 9.3 make一个blast 数据库 建一个Ebola病毒的基因组序列,因为index的时候会产生很多文件,所以建立一个新文件夹,命名为refs 因为reference可能包含很多 19:10 KM233090.fa.nin -rw-r--r-- 1 ucco staff 4.6K 6 23 19:10 KM233090.fa.nsq 9.4建立一个query序列 head
通常大家提到转录组测序,指的是mRNA-seq,在测序文库构建的实验阶段我们有两个选项: 去除rRNA 富集polyA 因为真核生物的mRNA都是有polyA尾巴结构,示意图如下: ? 不含有polyA尾巴 6.部分也会翻译小肽段 既然都说lncRNA只有部分具有polyA尾结构,我这里出一个学徒作业,希望大家可以下载人和鼠的gtf文件,以及转录本fasta序列文件,自己去探索一下: gtf文件记录了多少个基因,多少个是蛋白编码基因多少个是lncRNA呢? 、转录本分布 04: 多个同样行列式文件的合并 05: 根据GTF画基因的多个转录本结构 06: 下载最新版的KEGG信息,并且解析好 07: 写超几何分布检验 08: ID转换 09: R语言爬虫 10 : R语言shiny 11: 用Biostrings包来处理fasta序列 12: 根据指定染色体及坐标得到序列 13: JSON 数据的格式化 14: fasta 数据处理
一个接口同时满足 FASTA/Q 文件读写需求 轻量级、内存节约 随机访问压缩的 FASTA/Q 文件 逐条迭代读取 FASTA 文件 计算 FASTA 文件的 N50 和 L50 计算序列的 GC 含量和核酸组成 计算反向互补序列 良好的兼容性,支持分析非标准的 FASTA 文件 支持 FASTQ 文件的碱基质量值转换 提供命令行接口用于拆分 FASTA/Q 文件 功能很多,覆盖了平时序列文件操作的常见需求。 Pyfastx 内部含有多个功能模块,比如: FASTX 接口,为迭代 Fasta/q 文件提供统一的接口 FASTA 接口,迭代或随机访问 Fasta 文件 FASTQ 接口 ,迭代或随机访问 Fastq /test.fa.gz contains 211 seqs FASTA 文件迭代 Fasta 文件中每条序列最重要的就是名称和序列信息了,这两个信息可以方便地通过迭代返回。 类 FASTA 对象有许多属性和方法可供使用,如计算 GC 含量、计算 N50/L50、提取任意序列等。
背景 目前新冠病毒的基因组拼接主要采用与参考序列比对,生成一致性序列的方法。所以,参考序列就非常重要,那么参考序列从何而来,参考序列是否准备,遇到新物种如何构建参考序列? 测序数据样本来自于一个 41 岁男性患者,测序为宏基因组测序,里面除了包含新冠病毒序列,宿主人基因组之外,还包括其他一些微生物。 NCBI blast 数据库进行比对,验证序列来自于何种物种,这里注意,由于当前的最新的数据库已经包含新冠病毒数据库,因此,需要比对 2019 年 12 月之前的数据库,或者直接与 SARS 序列进行比对 是否已经是完整基因组,拼接结果中是否还包含其他冠状病毒序列,序列是否连接错误,测序位点是否正确? 对于尾部 A 的问题,如果 PCR 产物可以比对到 NC_045512 尾部 A,则可以证明基因组中包含该段区域。
本文就根据高教授在ResearchGate上公开的中文文章(以下简称“文章”),看一看此文做了什么工作,如何得到这些结果,并顺便根据此文之思想“发现”一些武汉新型冠状病毒基因序列中的信息。 图1A展示的是不同病毒的“Nankai CDS”,作者称此区域包含一段22bp的互补回文序列,实际上可以看到,在部分碱基点突变后此区域并不“回文”;图1B展示的是不同病毒的CDS区序列去除图1A中8-11bp 2.2 构建进化树 作者在文章中是如此描述的: 进化树构建使用 13 条去除可变区的 Nankai CDS 简单的说就是使用各序列的ORF 3 CDS区进行局部比对,构建了一个进化树,并称之为: 当前大部分的冠状病毒基因组研究都是简单使用全基因组或某个病毒结构基因的序列 在这里,我从所有符合条件的序列中手动选出了文章中所说的10条序列(未添加此次的新型冠状病毒序列),使用blast提供的Blast Tree View查看进化树,结果如图3所示。与图1B基本一致。 ? 高教授的这篇文章槽点实在太多,不过此文的方法都很经典,比如我在这篇“教程”中用到的互补回文序列筛选、六框翻译等,倒是可以作为生物信息学课程的实践内容。
DBG图中一个edge的覆盖度定义为包含该edge对应k-mer的reads数目,一条contig序列也即一条path的覆盖度则为所有edge覆盖度的均值。 的配置文件,包含文库的位置信息以及其他信息 -o:输出文件文件名前缀 -K:kmer大小,最小13、最大63/127的奇数 -p:程序运行使用的核数 -a:初始的内存:避免内存再分配,单位为G -d:kmer **/fasta_read_single.fa #单向测序得到的fasta格式的序列文件 p=/path/**LIBNAMEA**/pairs_in_one_file.fa #双向测序得到的一个fasta _2.fq screen.clean.fa 其中参数--paired为当双末端测序数据在一个文件中,--merge为当双末端测序在两个文件中,--filter表示过滤含有N的reads。 --num_threads 20 --min_contig 300 & 其中参数含义如下所示: -o,--out:结果输出路径 -r,--read:输入的序列数据,fasta格式 (reads长度<=500
酶切图谱 通过软件自带的脚本可以产生基因组对应的酶切图谱,输入内切酶的名称或者酶切位点序列都可以,用法如下 digest_genome.py -r A^AGCTT -o mm9_hindiii.bed 参考基因组索引 软件采用bowtie2将reads比对到参考基因组上,所以需要对基因组的fasta文件建立索引,用法如下 bowtie2-build hg19.fasta hg19 3. 染色体长度文件 从UCSC下载染色体长度文件,或者自己根据fasta序列统计长度都可以,该文件内容如下 chr1 249250621 chr2 243199373 chr3 198022430 ── dixon_2M_2 ├── SRR400264_01_R1.fastq.gz └── SRR400264_01_R2.fastq.gz 每个样本一个子文件夹,下面是对应的双端测序的 -2.11.1/test_data/ `-- tmp 其中hic_results目录下是最终结果,包含了不同分辨率下的hi-c图谱和质控的图表。
经过质量控制,测序数据中已经不包含非生物的异常序列了,下面我们用vsearch[1]软件完全后续分析。 fasta 结果文件中每条序列在一行中最多显示的字符数,默认是 80,0 表示不做限制; 2.降噪(denoise) 按 97%相似度对序列进行聚类曾经是扩增子序列分析的金标准,但这有一个问题,就是物种只能鉴定到属或种 fasta 文件; --centroids,fasta 结果文件,包含每一个聚类中的种子序列; --consout,fasta 结果文件,包含每一个聚类的一致性序列; --minsize,降噪最低的序列丰度要求 ,限定 fasta 结果文件中每条序列在一行中最多显示的字符数,默认是 80,0 表示不做限制; --clusterout_sort,结果文件中序列的顺序默认是按其在输入文件中的顺序,设定该参数则是按照降噪后序列的丰度排序 ,在结果文件中序列名称后面添加丰度信息; --fasta_width,限定 fasta 结果文件中每条序列在一行中最多显示的字符数,默认是 80,0 表示不做限制; 4.创建 OTU 表 OTU(operational
其优势是: 定量时考虑到不同样品中基因长度的改变(比如不同isoform的使用) 速度快、需要的计算资源和存储资源小 敏感性高,不会丢弃匹配到多个基因同源区域的reads 可以直接校正GC-bias 自动判断文库类型 gffread GRCh38.gtf -g GRCh38.fa -w GRCh38.transcript.fa.tmp # gffread生成的fasta文件同时包含基因名字和转录本名字 grep '>' GRCh38.transcript.fa.tmp | head # 去掉空格后面的字符串,保证cDNA文件中fasta序列的名字简洁,不然后续会出错 cut -f 1 -d ' ' GRCh38 fastq-dump -v --split-3 --gzip SRR1039521 rename "SRR1039521" "trt_N061011" SRR1039521* # -p: 表示若待创建的文件夹已存在则跳过 ;若不存在,则创建;也可用于创建多层文件夹 # man mkdir 可查看详细帮助 mkdir -p trt_N061011 # -l: 自动判断文库类型,尤其适用于链特异性文库 # The library
咱们《生信技能树》的B站有一个lncRNA数据分析实战,缺乏配套笔记,所以我们安排了100个lncRNA组装案例文献分享,以及这个流程会用到的100个软件的实战笔记教程! 下面是100个lncRNA组装流程的软件的笔记教程 seqtk在生信届被誉为序列处理的瑞士军刀,其出自生信大神李恒之手,李恒是SAMtools、BWA、MAQ等著名生信软件的核心作者。 seqtk基于C语言编写的软件,运行速度极快,极大的提高工作效率。seqtk日常序列的处理包括,比如:fq转换为fa,格式化序列,截取序列,随机抽取序列等。 -s100 Sample_R1.fq.gz 10000 # 可直接对压缩文件进行序列随机提取,在提取R1和R2两个文件的时候,需要-s值一致,才能使提取的序列id号对应。 3. subseq 提取序列 # 根据输入的bed文件信息,将固定区域的序列提取出来: seqtk subseq in.fa reg.bed > out.fa # 根据输入的name list,提取相应名称序列
接下来将 SILVA 比对的输出文件加载到 R 中,并创建一个数据框,其中包含 FL-ASV 编号、同一性百分比和最近亲属的 SILVA 分类法的列。 物种级别的分类则根据与模式菌株的比对结果获得,如果多个物种的参考序列都在物种级别阈值内,则不提供分类注释。 输出文件是一个 UCLUST 格式的文本。 六个 UCLUST 输出文件(种到门级)被加载到 R 中,每个文件都被转换成一个包含两列的数据框。 两个分类注释的合并也可能会导致一个分类单元有多个父分类的情况(例如,来自同一物种的序列可能附属于多个属)。在这些情况下,分类群中具有最低 ASV 编号的 FL-ASV 的分类将被分配给所有成员。 可在 output/ 文件夹中看到所有输出结果,中间文件位于 temp/。 一些注意点 流程依赖的 usearch 并非免费,所以不包含在 docker 镜像中。
Pysam[1]是一个 Python 模块,它打包了高通量测序库htslib[2]的 C-API,可用于读写基因组相关文件,如 Fasta/Fastq,SAM/BAM/CRAM,VCF 等。 import pysam # 构建FastaFile对象,随机访问需要先创建faidx,没有的话在这里会自动创建faidx fa = pysam.FastaFile("ex1.fa") # Fasta 文件中序列的数量,结果是一个整数 print("number of reference sequences: %d" % fa.nreferences) # Fasta文件中序列的名称,结果是一个列表 print("names of reference sequences: " + ",".join(fa.references)) # Fasta文件中序列的长度,结果是一个列表 print("lengths 写在后面 Pysam 作为一个轮子读写基因组相关文件很好用,可以替代 Biopython 的这部分功能。。
然而,使用独特分子标识符(UMI)的protocol 通常包含一个带有细胞和UMI barcode 和 adapters 但没有任何转录序列的read。 通常它们不会在基因组中包含ERCC序列,因此在BAM / CRAM文件中不会比对ERCC read。 less'和'more'可用于检查命令行中的任何文本文件。通过使用“|”将samtools视图的输出到这些命令中,而不必保存每个文件的多个副本。 NCBI往往更严格,仅包括高置信度基因注释。而UCSC包含多个使用不同标准的基因组注释。 如果您的实验系统包含非标准序列,则必须将这些序列添加到基因组fasta和gtf中以量化它们的表达。 没有标准化的方法来做到这一点。以下是我们的自定义perl脚本,用于为ERCC创建一个gtf和fasta文件,可以将其附加到基因组中。
上一篇文章生物信息中的Python 01 | 从零开始处理基因序列自己造轮子实现了序列的基础操作,但是在Python的世界里,一项工作只要重复的次数多了,那么一定就会有大神来开发相应的包来解决,这个包名就是 3.2 直接用安装包安装 二、Biopython 基础用法 1 读取常见的序列文件格式(fasta,gb) from Bio import SeqIO # 读取包含单个序列 Fasta 格式文件 fa_seq = SeqIO.read("res/sequence1.fasta", "fasta") # print fa_seq # 读取包含多个序列的 fasta 格式文件 for fa in SeqIO.parse ("res/multi.fasta", "fasta"): print (fa.seq) # 一个多序列文件中的所有序列 seqs = [fa.seq for fa in SeqIO.parse ("res/sequence1.gb", "genbank") print (gb_seq) 2 浏览 fasta 序列文件内容 from Bio import SeqIO # 读取包含单个序列 Fasta
,gb) from Bio import SeqIO # 读取包含单个序列 Fasta 格式文件 fa_seq = SeqIO.read("res/sequence1.fasta", "fasta") # print fa_seq # 读取包含多个序列的 fasta 格式文件 for fa in SeqIO.parse("res/multi.fasta", "fasta"): print ( fa.seq) # 一个多序列文件中的所有序列 seqs = [fa.seq for fa in SeqIO.parse("res/multi.fasta", "fasta")] print (seqs ", "fasta") # =====获取详细的信息===== # 提取基因ID,name # Fasta 文件中序列名所在行的第一个词被作为 id 和 name print ("id: ", fa_seq.id (gb_seq) # =====获取详细的信息===== # 提取基因ID,name # gb文件中序列名包含比fasta更加详细的序列信息,下面分别是 id 和 name print ("id:
DNA 序列的 GC 含量是指序列中'G'和'C'所占的百分比。 一条 DNA 序列很容易表示,但是如果有多条 DNA 序列放在一起,则每条序列必须被标记,通常的做法是保存为 FASTA 格式文件。 在这种格式中,序列的名称占一行,名称的最前面是一个大于符号‘>’开头,序列名称后面可以跟一系列说明;序列信息从名称的下一行开始,直到遇到下一个以‘>’开头的序列名称为止。 Fasta 格式文件可参考下面的示例数据。 给定:一个 Fasta 序列文件。 需得:GC 含量最高的序列名称及其 GC 含量(各占一行行输出)。 (s) def max_gc_content(infasta): dna = {} with pysam.FastxFile(infasta) as fh: for r 文件,并将其放入字典中;详细用法见:基因组文件读写(pysam) max 函数的使用,特别是为其构造一个 key 函数并传入,这是解本题的关键,GC 含量本身是很容易理解的。
如果是单个文件可以借助alter这个在线工具来完成。 如果需要转化的文件很多,可以借助python中的dendropy这个模块,然后写python脚本完成批量转化。 今天有人发邮件问批量转化nexus格式为fasta格式。 如果是单个文件可以借助alter这个在线工具来完成。 如果需要转化的文件很多,可以借助python中的dendropy这个模块,然后写python脚本完成批量转化。 今天有人发邮件问批量转化nexus格式为fasta格式。 如果需要转化的文件很多,可以借助python中的dendropy这个模块,然后写python脚本完成批量转化。 今天有人发邮件问批量转化nexus格式为fasta格式。
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