动物行为实验指南丨喷雾测试诱发的啮齿动物Grooming行为

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《动物行为实验指南》共674页，涵盖了常见的实验动物，如小鼠、大鼠和斑马鱼，详细描述了每一种行为测试的实验设计、测试设备、实验流程、评估指标、预期结果、常见问题及解决方法、数据分析、模型应用与局限性等各个方面。它通过快速引导，帮助研究人员高效地掌握实验的每个阶段，减少了查阅文献和寻找方法的时间，成为各类科研人员的重要参考资料。

《动物行为实验指南》共计收录了16种动物行为类型，包括焦虑抑郁、学习记忆、痛觉、运动、恐惧、社交、癫痫、操作、成瘾、视觉、痒觉、味觉、嗅觉、睡眠、斑马鱼行为以及常见动物模型等内容。每一类动物行为下，都详细介绍了多个经典的实验范式，涵盖了超过100种实验方法。

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喷雾诱发的理毛（Grooming）行为已被用于高压力和低压力条件下的神经行为分析。通过控制喷雾条件和环境因素，可以较为精确地观察和分析理毛行为与神经系统、应激反应等方面的关系。

Fig1 喷雾测试示意图

在黑暗环境中观察鼠因喷雾刺激而引发的理毛行为。进行喷雾测试时，将鼠置于一个塑料测试箱内，让其在箱中适应2小时。为了引发理毛行为，用手动喷雾器向箱内的鼠喷洒（23摄氏度的）水：将鼠面向喷雾喷嘴放置（距离20至30厘米），从上方轻轻喷洒4-8次，使鼠背部充分被水雾覆盖。这一步骤用于诱导或增强特定的行为反应，如自我梳理行为。然后，用摄像机记录鼠接下来20分钟的行为。通过这些视频，确定理毛发作的次数和持续时间（理毛发作的特征是不间断的持续自我理毛行为），以及在每次理毛发作中，梳理特定身体部位（即包括鼻子的面部区域、头部和颈部，或包括尾巴和生殖器区域的身体部位）的时长占比。主要关注的是总自我梳理时间、自我梳理次数以及每次梳理的持续时间。

数据分析：

总自我梳理时间：在整个20分钟记录期间，小鼠花费在自我梳理上的总时间。

理毛次数：统计在记录时间段内鼠出现理毛行为的次数。这可以反映理毛行为的发生频率，次数越多可能表示鼠的某种行为倾向越强，比如可能暗示其处于更高的应激状态或有更强的清洁需求等。 

理毛持续时间：计算每次理毛行为持续的时间以及总的理毛时间。持续时间长可能意味着鼠对自身清洁或情绪调节的需求较高，或者反映出其神经系统对应激的一种特定反应模式。在应激条件下，可能会出现持续时间较短但频繁发作的理毛行为。

理毛身体部位：分析鼠梳理不同身体部位的时间分配和频率。通常将身体部位分为面部（包括鼻子）、头部和颈部、身体（包括尾巴和生殖器区域）等。不同身体部位的理毛情况可能与不同的生理或心理状态相关。比如，较多地梳理面部可能与情绪紧张或嗅觉相关的信息处理有关，而更多地关注身体其他部位可能与身体的不适感或对特定部位的关注有关。

总结：

喷雾诱发的理毛行为与其他因素诱发的理毛行为（如OFT、EPM和社交压力等因素诱发）明显不同。

喷雾诱发的理毛行为在不同环境条件下会呈现出不同模式。在非压力条件下，如本研究中让鼠在测量箱中适应2小时后，在黑暗环境中喷洒室温的水诱发的理毛行为，呈现出从头到尾的“非压力”模式，即理毛行为较为连续；而当鼠在暴露于OFT、EPM和社交压力等压力条件后再由喷雾诱发理毛行为时，则会出现间断性的“压力”模式，理毛行为会被打断；喷雾诱发理毛行为是通过向鼠喷洒特定温度（如23摄氏度）的水来实现，通常在特定的实验环境中进行，如让鼠先在测试箱中适应一段时间后再进行喷雾。而OFT诱发理毛行为是通过将鼠置于一个开阔的、新颖的空间环境中，鼠可能会因为对新环境的探索或焦虑等产生理毛行为。EPM诱发理毛行为是利用高架十字迷宫这种具有开放臂和封闭臂的特殊装置，鼠在面对这种环境时，由于对高处和开放空间的恐惧等因素而引发理毛行为。社交压力诱发理毛行为则是通过将鼠与陌生的同类雄性放在一起，鼠因社交互动中的压力而出现理毛行为。OFT诱发的理毛行为更多地用于研究鼠的探索行为、焦虑水平以及对新环境的适应能力等。EPM诱发的理毛行为主要用于评估鼠的焦虑相关行为，因为高架十字迷宫的特殊结构能有效引发鼠的焦虑情绪，从而通过观察理毛等行为来分析其焦虑状态。社交压力诱发的理毛行为则侧重于研究鼠在社交情境中的行为反应和心理状态，对于理解动物的社交行为和应激机制具有重要意义。 

注意事项：

精确控制喷雾的各项参数，如水温、喷雾次数、喷雾距离等，确保每次实验的喷雾条件一致，以保证诱发的理毛行为具有可比性。