动物行为实验指南丨多新奇物体交互测试方法

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《动物行为实验指南》共674页，涵盖了常见的实验动物，如小鼠、大鼠和斑马鱼，详细描述了每一种行为测试的实验设计、测试设备、实验流程、评估指标、预期结果、常见问题及解决方法、数据分析、模型应用与局限性等各个方面。它通过快速引导，帮助研究人员高效地掌握实验的每个阶段，减少了查阅文献和寻找方法的时间，成为各类科研人员的重要参考资料。

《动物行为实验指南》共计收录了16种动物行为类型，包括焦虑抑郁、学习记忆、痛觉、运动、恐惧、社交、癫痫、操作、成瘾、视觉、痒觉、味觉、嗅觉、睡眠、斑马鱼行为以及常见动物模型等内容。每一类动物行为下，都详细介绍了多个经典的实验范式，涵盖了超过100种实验方法。

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小鼠多新奇物体交互（Multiple Novel Object Interaction, MNOI）测试 是一种行为实验范式，用于评估小鼠的探索行为、记忆能力和对新奇事物的兴趣。这种测试可以帮助了解小鼠的认知功能，特别是在识别和记住环境中物体的能力方面。一个开放场或封闭箱体，通常是一个方形或圆形的操作箱，多个不同的物体在形状、颜色、质地等方面各不相同，并且可以固定在操作箱的不同位置。

在三周的时间里，每天让小鼠适应实验人员和实验箱（长40厘米×宽40厘米×高50厘米）。在实验前的最后三天，还让小鼠在箱内适应一个新奇物体，以尽量减少小鼠对新奇物体产生的应激反应。MNOI测试采用自由接触的方式设计。在实验前，将小鼠放置在箱内15分钟。然后，把20个新奇物体（具有不同的形状、颜色、质地和材料）随机放置在箱内各处，让小鼠与这些物体进行交互，交互时间为2分钟，并且在整个测试期间都施加光遗传激光刺激（激光开启4.7秒和关闭0.3秒交替进行）。所有物体都体积较小（长度在0.5至1.0厘米之间）且较轻，以便小鼠能够叼起并移动它们。使用一台固定在实验箱顶部天花板上的摄像机以及两台侧面的摄像机对小鼠的行为进行视频录制。

在与物体交互过程中表现出的行为分类如下：接近：小鼠头部转向物体，同时身体移动使小鼠与物体之间的距离缩短；当小鼠距离物体0.5厘米时，接近行为结束；浅度交互：小鼠处于物体的胡须可及范围内（距离小于0.5厘米），面向物体且似乎“专注于”该物体至少5帧画面的时间，这可能包括用鼻子触碰物体，但不包括啃咬物体；深度交互：采取以下至少一种动作：啃咬（用嘴叼住物体，和/或头部做出轻咬动作，但不会叼着物体四处走动）、抓取（用前爪握住物体，或者站在物体上方挡住物体，有效地阻止物体移动），和/或搬运（用嘴叼着物体，同时在箱内四处走动，有效地移动了物体）；离开物体：在浅度或深度交互后远离物体（直到鼻子与物体的距离达到0.5厘米）。这些动作中的每一个都对应于20个物体中的某一个。将小鼠未执行上述动作（接近、嗅闻、深度交互和离开）的时间归为静止或行走（以0.05厘米/秒的移动速度进行二分类）。 

数据分析：

探索时间：

记录小鼠探索每个物体的时间。探索定义为小鼠鼻子距离物体小于2厘米的行为；分别记录小鼠对新奇物体和熟悉物体的探索时间。

互动频率：

记录小鼠与每个物体互动的次数（例如用鼻子触碰物体或围绕物体移动）。

空间偏好：

如果有多个新奇物体，记录小鼠对不同位置的新奇物体的偏好。

行为特征：

观察并记录其他行为特征，如焦虑水平（如在中央区域停留的时间）、活动水平（如总移动距离）等。