通过电泳图判断基因型

一.通过电泳图判断基因型理论：

一对等位基因之间（野生型和突变型），由于碱基序列不同，导致酶切位点不同。

举个例子：

A基因没有EcoRI限制酶识别序列。

突变成a基因后，有了EcoRI限制酶识别序列。

这样，A和a基因二者使用EcoRI限制酶切割，再电泳后，DNA条带数量和大小就不同。

根据电泳的条带的数量和大小，就可以反推判断基因型。

例如，杂合子Aa个体，使用EcoRI限制酶切割，再电泳后，就会出现3条DNA条带。

二.典型例题：

（2024年山东卷25T）研究发现基因L能够通过脱落酸信号途径调控大豆的逆境响应。利用基因工程技术编辑基因L，可培育耐盐碱大豆品系。在载体上的限制酶BsaI切点处插入大豆基因L的向导DNA序列，将载体导入大豆细胞后，其转录产物可引导核酸酶特异性结合基因组上的目标序列并发挥作用。载体信息、目标基因L部分序列及相关结果等如图所示。

（2）重组载体通过农杆菌导入大豆细胞，使用抗生素______筛选到具有该抗生素抗性的植株和。为了鉴定基因编辑是否成功，以上述抗性植株的DNA为模板，通过PCR扩增目标基因L，部分序列信息及可选用的酶切位点如图乙所示，PCR产物完全酶切后的电泳结果如图丙所示。据图可判断选用的限制酶是______，其中纯合的突变植株是______（填序号）。

【答案】（2）.卡那霉素   . Sac Ⅰ    .

三.变式训练：

疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病，可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因编码的蛋白，在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变，从而获得了对氯喹的抗性。对患者进行抗性筛查，区分氯喹敏感患者和氯喹抗性患者，以利于分类治疗。

1）.研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物，用于扩增目的片段，如图甲所示。为选出正确和有效的引物，以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图乙所示。

下列关于引物F1、F2、R1和R2的叙述，错误的是（ ）

A．F1-R1引物可用于特异性地扩增目的片段

B．F1-R2引物不能用于特异性地扩增目的片段

C．F2为无效引物，没有扩增功能，无法使用

D．R2引物可用于特异性地扩增目的片段

答案．D

2）.为了筛查疟原虫感染者，以及区分对氯喹的敏感性。现有6份血样，处理后进行PCR。产物用限制酶ApoⅠ消化，酶解产物的电泳结果如图所示。

1~6号血样中，来自于氯喹抗性患者的是（ ）

A．1号和6号      B．2号和4号

C．3号和5号       D．1号、2号、4号和6号

答案．B

链接：https://pan.quark.cn/s/b20f705df7f4

链接：https://pan.quark.cn/s/0da45937768f