BALB/c小鼠和C57BL/6J小鼠被广泛地应用于行为和遗传学研究。
高架十字迷宫
装置为内壁及底面均涂成黑色的木质结构,包括两条相对开臂(50cm×50cm)和两条相对闭臂(50cm×10cm×40cm),闭臂的上部不封闭,中央设置一个联结四臂开阔平台(10cm×10cm),两条开臂与两条闭臂呈十字交叉型,闭臂顶部敞开。此迷宫距离地面的高度为50cm,在中央开阔平台的上方安置摄像机。
高架十字迷宫,型号:XR-XG201,上海欣软
实验前准备:
实验测试室必须始终保持安静无人。实验小鼠在实验开始前1h运入实验室。将实验室灯光调至摄像机能拍摄到的最低能见度。实验开始前,将小鼠单笼放置,给小鼠5min的自由探索时间。
测试实验:
5min的自由探索时间后,快速将实验小鼠放置在高架十字迷宫的中间开阔平台处(动物头朝向任一开放臂端),放置后立即开始测试观察,此时实验人员保持在迷宫1m以外,观察时间为5min,每只小鼠在高架十字迷宫中的表现情况由摄像机记录。每只小鼠观测结束后,清除干净动物粪便,使用清洁毛巾擦拭迷宫,然后用75%酒精再次擦拭,用以掩盖小鼠留下的气味。待酒精挥发完全后,可进行下一只小鼠的观察测试。
实验观察记录内容:
实验记录小鼠进入开放臂、闭臂的次数及在各臂上滞留的时间,以小鼠的四肢全部进入臂内或全部臂外为准。计算小鼠进入开放臂的次数和停留时间分别占进入两臂次数总和与在两臂停留时间总和的百分比例。记录小鼠处于中央开阔平台或开放臂时,出臂向迷宫下面探究(鼠头部和肩部同时出臂为准)的次数。记录小鼠在闭臂前身体直立(以前腿抬起后腿支撑为准)次数。
差异分析:
目前,高架十字迷宫已成为国际上公认的动物焦虑表现行为测评的首要装置。状态焦虑和特质焦虑是动物的两种焦虑行为,在高架迷宫实验中,实验动物向下探究次数和在闭臂内后腿直立的次数这两组数据的稳定性较差,提示这两个数据是用来评价实验动物状态焦虑的指标,而实验动物进入高架迷宫开放臂的次数与时间,分别占进入两臂次数总和与在两臂停留时间总和的百分比复测性度较高,所表现的是实验动物趋近-规避冲突的行为结果,为评价动物特质焦虑表现的主要指标,与动物焦虑的程度直接相关,一般这两个指标之间也是具有高度相关性,如果动物在开放臂探索时间和次数的比例减少,则说明动物的焦虑程度高。
C57BL/6J小鼠在高架迷宫实验中所记录的入开臂次数、入开臂次数比例、入开臂时间、入开臂时间比例和在中央区停留时间均极显著高于BALB/c的同性别小鼠,且这两种近交系小鼠的雌性小鼠在这些标志性指标上的数据均高于雄性小鼠,提示作者无论C57BL/6J或BALB/c小鼠的雌性小鼠均比雄性小鼠更不焦虑,且C57BL/6J雌性小鼠是此次实验中焦虑行为表现最低的,这与既有的研究结果一致。与其他结果稍有不同的是,此次试验中BALB/c雌性小鼠在中央区停留时间较雄性小鼠稍短,可能与所选用实验动物的周龄或者情期不同有关。此次实验为了避免无关刺激对实验小鼠的影响,增加实验结果的准确性,在实验前一周内每天抚触实验小鼠,并且实验开始前,将小鼠单笼放置,给小鼠5min的自由探索时间,以提高小鼠入臂的总次数。
Table1 两个品系的小鼠在高架十字迷宫中与焦虑相关的探索行为表现
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文献引用:
1.大鼠高架十字迷宫中的行为表现及海马GluR1蛋白水平的性别差异[J]. 向小军;郝伟;Therese A.Kosten.中南大学学报(医学版),2011(08)
2.养心开郁片对小鼠焦虑模型行为学的影响[J]. 王开娜;刘岗;杨健;张硕峰;王静怡.现代中医药,2011(02)
3.Aging effects on elevated plus maze behavior in spontaneously hypertensive, Wistar-Kyoto and Sprague–Dawley male and female rats[J]. Sherry A. Ferguson;;Erika P. Gray.Physiology & Behavior,2005(5)
4.The use of a plus-maze to measure anxiety in the mouse[J]. Richard G. Lister.Psychopharmacology,1987(2)
5.张燕,郑伟,丁莹,等.BALB/c和C57BL/6J小鼠高架十字迷宫焦虑表现行为比较[J].疾病预防控制通报,2012,27(03):18-20.
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